心肺复苏后大鼠皮质区凋亡相关性微小RNA的表达变化研究

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huihui1989
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目的:  观察心搏骤停-心肺复苏(Cardiac-Arrest/CardiopulmonaryResuscitation,CA-CPR)后大鼠大脑皮质区凋亡相关性微小RNA(microRNA,miRNA)的表达变化,探讨影响CPR的机制。  方法:  选择成年雄性清洁级SD(Sprague-Dauley)大鼠24只,按随机数字表法分为正常对照组、假手术组和CA-CPR组,每组8只。采用窒息致CA后CPR法建立CA-CPR大鼠模型;正常对照组不进行任何操作;假手术组仅施行腹腔麻醉、气管切开、血管穿刺及心电监护等操作,不夹闭气管,不复苏。CA-CPR组于自主循环恢复后(Restoration of spontaneous circulation,ROSC)、正常对照组于正常饲养、假手术组于气管切开后24 h时取大脑皮质区提取总RNA(Ribonucleic acid),采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(Quantitative real-timefluorescent quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction, qRT-PCR)测定大脑皮质区凋亡相关性miRNA的表达;采用流式细胞仪检测神经细胞凋亡率;光镜下观察各组ROSC后24 h时点大鼠皮层额叶组织病理改变。  结果:  与正常对照组比较,假手术组大鼠miRNA表达及细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,CA-CPR组大鼠大脑皮质凋亡相关性miRNA有16个上调(分别为Let-7c、miR-15a、miR-21、miR-24、miR-29、miR-29b、miR-34a、miR-103、miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-210、miR-326、miR-338-3p、miR-494、miR-497),22个下调(分别为Let-7a、Let-7b、Let-7d、Let-7e、miR-19a、miR-19b-1、miR-20a、miR-20b、miR-23a、miR-23b、miR-25、miR-98、miR-107、miR-122a、miR-125a、miR-125b、miR-145、miR-181a、miR-181c、miR-335、miR-384-5p、miR-422a),其中有8个miRNA出现变化明显,其中(miR-15a、miR-21、miR-34a、miR-497分别上调了:6.831±2.625、8.122±3.442、5.349±2.010、6.590±3.689倍;miR-125b、miR-145、Let-7a、Let-7e分别下调了0.122±0.039、0.199±0.096、0.191±0.069、0.160±0.082倍)。CA-CPR组皮质区细胞凋亡率[(32.23±5.31)%]较正常对照组[(3.66±1.34)%]和假手术组[(4.98±1.84)%]明显升高(均P<0.01)。光镜下CA-CPR组大鼠皮层额叶组织及海马细胞出现显著的病理变化;结论:  大鼠CA-CPR后早期(CA后12h内)脑组织存在明显的细胞凋亡,同期大脑皮质区凋亡相关性miRNA的表达也发生变化,其中发生明显变化的miRNA可能是CA-CPR后脑保护的新靶标。
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