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目的:本研究旨在通过IHC分析PCBP2在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达情况,分析PCBP2在结直肠癌组织中表达是否高于癌旁正常组织,明确PCBP2在结直肠癌细胞、癌组织中的表达及与临床参数之间的关系;进一步拟利用HCT-116和HCT-15两株结直肠癌细胞通过细胞生物学和分子生物学实验来确认PCBP2是否参与结直肠癌细胞的生长、增殖、转移和凋亡,并分析其分子机制,为结直肠癌的诊断、预后和开发新的靶向药物提供理论依据,为临床结直肠癌治疗方案制定提供理论指导。方法:1、选取50例来自安徽医科大学第一附属医院的结直肠癌病人癌组织和癌旁的病理标本。2、通过免疫组化检测PCBP2在结直肠癌组织和癌旁的表达。3、通过RT-PCR检测转染siPCBP2后HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞中的PCBP2 mRNA的表达情况。4、通过WB检测HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞在转染siPCBP2后PCBP2的蛋白表达。5、利用软琼脂克隆形成实验检测HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞在siPCBP2后的增殖情况,计数细胞集落的形成数。6、通过CCK8试剂盒检测HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞在转染siPCBP2后的细胞活力。7、通过细胞小室Transwell实验检测HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞在转染siPCBP2后的细胞迁移和侵袭能力。8、利用Annexin V/PI试剂盒进行细胞凋亡检测标记HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞在转染siPCBP2后的凋亡细胞然后用荧光显微镜拍照记录。结果:1、免疫组化检测结果显示:在结直肠癌病人的癌组织中PCBP2的表达水平比癌旁的正常组织表达的PCBP2明显增高(P=0.001),且在结直肠癌病人中PCBP2的阳性率是72%,而在癌旁的正常组织中PCBP2的阳性率是40%,同时PCBP2与结直肠癌病人的淋巴结转移(P=0.031)和结直肠癌病人的临床分期(P=0.045)、术后复发(P=0.039)和总生存率(P=0.037)有关。2、蛋白印记结果显示:在HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞株中转染siPCBP2后,PCBP2的蛋白表达水平明显比NC对照组低,有明显的蛋白表达差异。3、RT-PCR检测结果显示:在HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞株中转染siPCBP2后PCBP2的m RNA表达水平明显降低,同时我们发现细胞周期相关蛋白Cyclin D1的m RNA表达水平也明显降低。4、CCK8检测结果显示:在HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞株中siPCBP2后,两结直肠癌细胞的细胞活力被明显的抑制,实验组转染siPCBP2后的细胞活力明显比NC组的细胞活力弱,同时OD值也表明实验组的细胞生长明显比NC组的细胞生长快。5、软琼脂克隆形成实验结果显示:在HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞株中siPCBP2后,实验组转染siPCBP2后的结直肠癌细胞集落克隆形成明显比NC组的细胞集落克隆形成少。6、细胞迁移实验结果显示:在HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞株中转染siPCBP2后,实验组转染siPCBP2后的结直肠癌细胞迁移数明显比NC组的细胞迁移数少。7、细胞侵袭实验结果显示:在HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞株中转染siPCBP2后,实验组转染siPCBP2后的结直肠癌细胞侵袭明显比NC组的细胞侵袭数少。8、细胞凋亡结果显示:在HCT-116和HCT-15两结直肠癌细胞株中转染siPCBP2后,实验组转染siPCBP2后的结直肠癌细胞凋亡明显比NC组的细胞数多。结论:1、PCBP2在结直肠癌病人组织中的表达水平明显比癌旁正常组织高,提示PCBP2与结直肠癌的发生,发展,淋巴结转移和无复发生存率和预后关系密切。2、转染siPCBP2后结直肠癌细胞活力、结直肠癌细胞生长、结直肠癌细胞克隆形成、结直肠癌细胞迁移和侵袭明显被抑制,HCT-116和HCT-15结直肠癌细胞凋亡增多,表明PCBP2促进结直肠癌细胞的发生发展和转移及细胞增殖。