流动注射化学发光法测定雌激素类药物的研究及应用

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雌激素是一种类固醇激素,主要由卵巢、滤泡、黄体以及妊娠胎盘生成。肾上腺皮质也产生少数雌激素。雌激素种类主要有天然雌激素,半合成雌激素和合成雌激素。天然雌激素主要有雌二醇,17β-雌二醇,苯甲酸雌二醇,戊酸雌二醇,环戊丙酸雌二醇,妊马雌酮,雌三醇等;半合成激素有炔雌醇和尼尔雌醇;合成雌激素有己烯雌酚和氯烯雌醚。雌激素类药物常见剂型主要有注射针剂、胶囊、膏剂、片剂以及气雾剂。雌激素具有生物活性,可以用来预防、诊断、治疗疾病并且可以帮助机体恢复到正常的状态,因此测定雌激素对妇科疾病有十分重要的意义。流动注射化学发光法(Chemiluminescence,CL),是一种高灵敏度、宽线性范围、简单快速、易于实现自动化的分析方法,在无机分析、药物分析和环境监测等方面具有独特的优势。将流动注射化学发光法用于药物定量分析不仅具有理论意义,而且还有重要的实用价值。本学位论文分为四部分。第一部分绪论介绍了流动注射化学发光法的原理及应用进展;介绍了几种常见发光体系在药物分析、食品分析和环境分析中的研究以及应用;研究雌激素类药物的意义及常见方法。第二部分主要采用高锰酸钾-邻菲罗啉钌-亚硫酸钠体系分别测定了醋酸泼尼松、黄体酮、戊酸雌二醇、左炔诺孕酮。实验发现,在酸性介质条件下,高锰酸钾能够氧化邻菲罗啉钌,产生弱的化学发光,醋酸泼尼松、黄体酮、戊酸雌二醇、左炔诺孕酮在亚硫酸钠存在的条件下能够强烈的增强高锰酸钾-邻菲罗啉钌的化学发光信号,据此分别建立了测定醋酸泼尼松、黄体酮、戊酸雌二醇、左炔诺孕酮的化学发光新方法。在所选的最佳实验条件下,醋酸泼尼松、黄体酮、戊酸雌二醇、左炔诺孕酮线性范围分别为: 4.0×10102.0×10-7 g·mL-1 ,1.0×10-104.0×10-8 g·mL-1,1.0×10104.0×10-8 g·mL-1,2.0×10-91.4×10-7 g·mL-1,检出限分别为4.5×10-11 g·mL-1,7.1×10-11 g·mL-1,5.6×10-11 g·mL-1,5.9×10-10 g·mL-1,并且对该体系的化学发光机理进行了初步的讨论。第三部分研究了在硫酸介质中,硫酸铈(Ⅳ)与罗丹明B反应可以产生较弱的化学发光,在注入雌二醇后能够显著增强该体系的化学发光强度。在一定的浓度范围内,体系化学发光强度与雌二醇的浓度呈良好的线性关系,由此结合流动注射技术建立了一种测定雌二醇的化学发光新方法。该方法的检出限为1.7×10-8 g·mL-1,线性范围为2.0×10-71.0×10-5 g·mL-1,对1.0×10-6 g·mL-1雌二醇平行测定11次,其相对标准偏差为1.2%。该法已成功用于合成样品中雌二醇含量的测定,结果令人满意。第四部分研究了在碱性介质中,基于己烯雌酚对铁氰化钾-鲁米诺化学发光反应体系的强烈抑制作用,建立了流动注射抑制化学发光测定己烯雌酚的新方法。本文研究了影响化学发光强度的因素并且讨论了化学发光反应的可能机理。本文确定的方法快速、准确、线性范围宽,测定己烯雌酚的检出限为7.6×10-9 g·mL-1,方法的线性范围为4.0×10-81.8×10-6 g·mL-1,对浓度为1.0×10-6 g·mL-1的己烯雌酚标准溶液进行11次平行测定,相对标准偏差为2.1%。
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