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本论文以探讨二丁酰环腺苷酸(dbcAMP)对肥育猪脂肪沉积的影响及其调控机理为目的,主要从生产性能指标、肉质指标、血液指标、组织脂肪细胞形态、组织激素基因表达等方面考察其对机体脂肪细胞的生长发育、脂质代谢的调控作用,并利用基因芯片筛选dbcAMP影响皮下脂肪组织生长发育的信号通路,从深层次上探讨dbcAMP调控肥育猪脂肪沉积的分子机理。动物饲养试验分为肥育前期和肥育后期两个饲养试验,分别选用18头100日龄平均体重为49.73±0.75kg和18头135日龄平均体重为78.34±1.22kg的杜长大三元杂阉公猪,随机分为2个处理组(0、15mg/kg组),每个处理3个重复,每重复3头猪。肥育猪饲喂玉米-豆粕型饲粮,各阶段饲喂期均为35天,饲养试验结束,每个处理组选取6头猪进行屠宰。试验结果表明:饲粮添加dbcAMP对两个日龄阶段肥育猪的平均日增重、日采食量和料重比的影响不显著(P>0.05)。饲粮添加dbcAMP对肥育猪的屠宰率、眼肌面积和瘦肉率的影响不显著(P>0.05),可以显著降低脂肪率和平均背膘厚度(P<0.05)。饲粮添加dbcAMP对100-135日龄阶段和135-170日龄阶段肥育猪的肌内脂肪含量、滴水损失、剪切力、PH值、肉色(L*值、a*值、b*值)的影响不显著(P>0.05)。饲粮添加dbcAMP可以显著降低肥育猪脂肪组织细胞的直径(P<0.05)。饲粮添加dbcAMP对肥育猪血清中的甘油三脂、胆固醇、脂肪酶、游离脂肪酸、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的影响不显著(P>0.05);可以显著提高100-135日龄阶段肥育猪血清中cAMP、GH、IGF-1、T3和T4的含量(P<0.05),对IGFBP-3、AD、Leptin和INS的含量影响不显著(P>0.05);可以显著降低135-170日龄阶段肥育猪血液中Leptin的含量(P<0.05),对cAMP、GH、IGF-1、IGFBP-3、T3、T4、AD和INS的含量影响不显著(P>0.05)。饲粮添加dbcAMP可以显著提高100-135日龄阶段肥育猪下丘脑ADCYAP1、GHRH、CRH、POMC、PC1mRNA和脑垂体GHRHR、GH和POMCmRNA表达量(P<0.05),对100-135日龄阶段肥育猪下丘脑PC2和脑垂体CRHR、TRHR和TSH mRNA表达量影响不显著(P>0.05);可以显著提高135-170日龄阶段肥育猪下丘脑GHRH、CRH、POMC、PC1mRNA表达量和脑垂体中GH和POMCmRNA表达量(P<0.05),对135-170日龄阶段肥育猪下丘脑PC2、ADCYAP1和脑垂体GHRHR、CRHR、TRHR和TSHmRNA表达量影响不显著(P>0.05);可以显著提高100-135日龄阶段肥育猪肝脏GHR、IGF-1mRNA和135-170日龄阶段肥育猪肝脏IGF-1mRNA的表达量(P<0.05),对135-170日龄阶段肥育猪肝脏GHRmRNA的表达量影响不显著(P>0.05)。为了进一步探讨dbcAMP对肥育猪脂肪沉积的调控分子机理,本研究利用Agilent Porcine Oligo Microarray芯片(共6张)筛查饲粮添加dbcAMP后135-170日龄阶段肥育猪(共6头,每处理组3头)背部皮下脂肪组织差异表达基因,并对差异表达基因进行数据分析,从不同层次分析和挖掘其中包含的具有生物学意义的信息。结果如下:筛选出饲粮中添加dbcAMP后肥育猪背部皮下脂肪组织差异表达的基因84个,上调表达14个,下调表达70个。对10个差异表达基因进行qRT-PCR验证,发现两种实验方法检测结果均为正相关,相关系数平均为0.846±0.05,表明芯片结果准确可靠,检测数据能够真实反映基因的表达变化规律。通过功能分类及信号通路显著性分析发现,dbcAMP可抑制脂肪组织细胞活化、白细胞迁移、细胞趋向性、细胞因子产生和免疫系统过程功能的活化;可通过降低细胞趋化因子信号转导通路中趋化因子(AMCF-II、CCL2、CXCL2、IL8)和趋化因子受体(CCR1、CCR3)的mRNA表达,降低细胞粘附分子信号转导通路中CD2、CD4、CD86、ITGB2、PDCD1LG2和MHC class II的mRNA表达,降低TOLL样受体信号转导通路中Toll样受体TLR4、TLR7和下游炎症因子CD86、IL6、IL8mRNA表达,从而抑制这些信号转导通路活化引起的炎症反应和胰岛素抵抗的产生,最终抑制脂肪细胞的增殖和分化和减少脂肪组织的沉积。由以上试验结果得出,dbcAMP可能通过以下几种途径调控肥育猪脂肪沉积:(1)dbcAMP直接进入肥育猪下丘脑和脑垂体组织细胞,通过调控GHRH-GH-IGF生长轴来促进GHRH、GH、IGF-1分泌,从而促进蛋白质合成及减少脂肪沉积。(2)dbcAMP直接进入肥育猪下丘脑和脑垂体组织细胞,通过调控下丘-垂体-肾上腺皮质轴来促进CRH、ACTH和肾上腺素的分泌,从而促进脂肪分解。(3)dbcAMP直接进入肥育猪脂肪组织细胞,通过降低肥育猪脂肪组织中趋化因子(AMCF-II、CCL2、CXCL2、IL8)和趋化因子受体(CCR1、CCR3)的mRNA表达,从而抑制细胞趋化因子信号转导通路活化引起的炎症反应和胰岛素抵抗的产生,最终抑制脂肪细胞的增殖和分化和减少脂肪组织的沉积。(4)dbcAMP直接进入肥育猪脂肪组织细胞,通过降低肥育猪脂肪组织中细胞粘附分子CD2、CD4、CD86、ITGB2、PDCD1LG2和MHC class II的mRNA表达,并抑制这些细胞粘附分子相关信号转导通路的活化,从而进一步抑制脂肪细胞的识别、活化、移动和炎症反应的发生,最终抑制脂肪细胞的增殖和分化和减少脂肪组织的沉积。(5)dbcAMP直接进入肥育猪脂肪组织细胞,通过抑制肥育猪脂肪组织中TLR4、TLR7的活化,并抑制MyD88依赖的通路下游促炎症因子IL-6、IL8和CD86的释放,从而抑制脂肪细胞的炎症反应和胰岛素抵抗的产生,最终抑制脂肪细胞的增殖和分化和减少脂肪组织的沉积。