论文部分内容阅读
目的：PCDH8（Protocadherin8）基因是部分肿瘤发展进程中的一种肿瘤抑制物，本实验旨在研究PCDH8的甲基化水平及其在鼻咽癌中的抑癌功能。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR），检测鼻咽癌细胞系C666-1、CNE1、HK1、HNE1、HONE1，正常的人的鼻咽上皮细胞系NP69及下咽癌细胞系Fadu里面PCDH8mRNA的转录的水平。在细胞系、41例鼻咽癌组织和16例慢性鼻咽炎组织中PCDH8启动子的甲基化水平用甲基化特异性PCR（MSP）来进行测定。然后再用该基因转染鼻咽癌细胞CNE1，检测该基因对该细胞的生理作用。结果：在正常鼻咽上皮细胞系NP69及下咽癌细胞系Fadu里面，PCDH8基因是稳定表达的。在这些鼻咽癌细胞系里面，HK1和HNE1细胞的表达是下调的，另三株均的表达是缺失的。甲基化的分析显示，PCDH8基因在鼻咽癌细胞系及Fadu细胞系中均发生了甲基化，鼻咽癌组织中甲基化率为85.3%(35/41)，而在正常鼻咽细胞系NP69和慢性鼻咽炎组织中均未发生甲基化。PCDH8基因的启动子的甲基化的水平与鼻咽癌病人的临床的病理参数全部没有任何的联系。用5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine，Aza)和曲古菌素A （trichostatin A，TSA）处理鼻咽癌细胞后，可恢复PCDH8的表达。PCDH8在鼻咽癌细胞里面的过表达，抑制了CNE1的生长和移动。结论：本实验第一次研究说明了PCDH8基因在鼻咽癌的细胞和组织里面都发生了启动子的甲基化，它还可以抑制CNE1的生长和移动。所以，PCDH8基因可以作为鼻咽癌的一个候选的抑瘤基因。