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人血白蛋白(human serum albumin,HSA)在临床治疗中具有广泛用途,利用基因工程技术生产重组人血白蛋白(recombinant human serum albumin,rHS A)有利于缓解HSA供给紧张的问题,且可避免血源性病原体风险。分离纯化是rHSA制备的难点,研发高性能的新型分离配基具有重要意义。本论文选取HSA位点Ⅱ为靶点,基于天然配基L-色氨酸,借助分子模拟设计新型分离配基,并制备新型介质,用于从毕赤酵母发酵液中分离rHSA。首先通过分子模拟研究了 HSA位点Ⅱ与L-色氨酸的结合机理,发现L-色氨酸的羧基和吲哚基对结合起关键作用。设计了 7个含有羧基和吲哚基的配基,分子模拟结果表明吲哚-3-戊酸(DL-5)配基与HSA结合的能力最强。为了便于介质制备,进一步设计了与DL-5结构相似的吲哚-3-乙酸-半胱氨酸(IAA-CYS)配基,分子模拟发现IAA-CYS配基与HSA结合的能力与DL-5接近。采用IAA-CYS配基制备了 IAA-CYS介质,与布洛芬进行了 HSA竞争性结合实验,结果表明HSA位点Ⅱ是潜在的IAA-CYS配基结合位点。构建了IAA-CYS-空间臂分子模型,通过分子模拟探讨了配基与HSA的结合机理。发现结合以静电相互作用为主,疏水相互作用为辅,其中羧基作用较大。考察了 IAA-CYS介质的HSA吸附性能,发现pH 4.0-5.0、NaCl浓度0-1.0 M范围内,HSA吸附量均高于100 mg/mL。pH 4.5是合适的HSA吸附条件,饱和吸附容量达到157.6mg/mL,且盐浓度影响较小。当线性流速100cm/h时,HSA动态载量达到59.1 mg/mL;添加200 mMNaCl,HSA动态载量仍有55.2 mg/mL。优化了分离条件,从毕赤酵母发酵液中分离rHSA,pH 4.5上样,pH 5.0和400 mM NaCl 冲洗,pH 8.0 和 200 mM NaCl 洗脱,rHSA 纯度为 90.1%,收率 88.6%。本论文针对HSA分离,设计了 IAA-CYS新配基,制备了 IAA-CYS新介质,实现了从毕赤酵母发酵液中分离rHSA,上样和洗脱条件温和,上样量较大,耐盐性好,料液不用稀释处理,且分离得到的rHSA纯度和收率均较高,显示了良好的应用前景。