目的:1.探讨复方颠倒散药物面膜的制备工艺。2.对复方颠倒散药物面膜的质量进行考察。3.考察复方颠倒散药物面膜经皮肤用药的安全性。4.考察复方颠倒散药物面膜的临床疗效及人体外用的安全性。方法:1.根据单因素考察和正交实验设计优化处方,以单硬脂酸甘油酯、16/18醇、液体石蜡等作为油相,以乙二胺四乙酸二钠盐和纯化水作为水相,以硬脂醇醚—2和硬脂基醚—21作为非离子表面活性剂,以甘油和丙二醇作为保湿剂,以汉生胶作为悬浮剂,以二氧化钛作为遮光剂。采用乳膏剂的制备方法制备复方颠倒散药物面膜。2.采用自身涂布、肉眼观察及显微镜下观察的方法评价面膜的外观及细腻度;分别采用恒温培养箱、冰箱、离心机及室温贮存的方法考察面膜的稳定性;用PH计测定复方颠倒散药物面膜的PH值。3.选择Fmmu豚鼠150只,新西兰大耳白兔8只。①取豚鼠70只,按随机数字表法分成7组,即完整皮肤高剂量组、完整皮肤中剂量组、完整皮肤低剂量组和破损皮肤高剂量组、破损皮肤中剂量组、破损皮肤低剂量组以及正常对照组,每组10只,进行急性皮肤毒性试验。给药方法:给药前将豚鼠对称性脱毛,脱毛面积大约为4cm×5cm。破损皮肤组采用手术刀片在脱毛皮肤区域作#字划痕,以渗血为度。分别取2.5g(高剂量)、2g(中剂量)、1.5g(低剂量)均匀涂抹于脱毛区。再以玻璃纸和双层纱布封包受试区。24小时后清洗受试物。连续观察14d,每日观察大鼠体重、进食量、呼吸、体态、眼、中枢神经系统、四肢活动、粪便性状及死亡情况。②取豚鼠40只,按随机数字表法分成4组,即高、中、低剂量组和正常对照组。每组10只,进行长期皮肤毒性试验。试验方法:给药前将豚鼠背部两侧脱毛,脱毛面积为4cm×5cm。分别取2.5g(高剂量)、2g(中剂量)、1.5g(低剂量)均匀涂抹于脱毛区。再以双层纱布和玻璃纸覆盖,再以无刺激性胶布封闭、固定,4小时后清洗受试物。每日给药1次,连续给药60天。每日观察豚鼠体重、进食量、呼吸、体态、眼、中枢神经系统、四肢活动、粪便性状及死亡情况。末次给药后24小时用10%的水合氯醛麻醉豚鼠(8ml/kg),然后取腹主动脉血3～4mL进行血液学、血液生化学检查,并对受试区皮肤组织及各脏器进行病理学检查。检查脏器包括:肝、肾、肺、心脏、脾、胃、胰腺、甲状腺、脑及生殖器官。③取家兔8只,按随机数字表法分成完整皮肤组和破损皮肤组,每组4只。采用同体自身左右对比法进行皮肤刺激性试验。试验方法:给药前24小时将家兔脊柱两侧去毛,去毛区范围每侧为7cm×7cm,去毛后24小时检查去毛皮肤是否因去毛而受伤。破损皮肤的制作:采用手术刀将去毛消毒皮肤划破,以渗血为度,左右两侧皮肤的破损程度应基本一致,在左侧去毛区涂受试药物2g,右侧涂赋形剂作为空白对照组。涂药24小时后,用温水去除残留受试物。此后1,24,48,72小时观察皮肤反应。④取豚鼠30只,按随机数字表法分成3组,其中第1组为复方颠倒散药物面膜组(复方颠倒散药物面膜0.2g/只),第2组为阳性对照组(0.1%2,4-二硝基氯代苯0.2ml/只),第3组为空白对照组(赋形剂0.2g/只)。每组10只,进行皮肤变态反应试验。试验方法:在致敏接触阶段,取复方颠倒散面膜0.2 g涂于豚鼠左侧脱毛区,用两层纱布和一层玻璃纸覆盖,再以无刺激胶布封闭、固定,6小时后去除敷料和清洗受试物。第7天和第14天以同样方法各重复1次。空白对照组与阳性对照组的方法同上;在激发接触阶段,于末次给受试物后致变态反应后14天,将受试物0.2g涂于豚鼠右侧脱毛区,其中阳性对照组给予0.1%2,4-二硝基氯代苯,6小时后去掉受试物,即刻观察皮肤变态反应情况,之后于24,48,72小时再次观察皮肤反应。4.将81例患者随机分成试验组(41例)和对照组(40例),其中试验组给予复方颠倒散药物面膜,对照组给予维胺酯维生素E乳膏,1小时后洗去,每日1次,连续治疗4周后判断疗效。5.统计分析:以SPSS13.0统计软件对实验数据进行统计分析,计量资料以(?)±S表示,两组组间显著性检验用独立样本T检验;多组组间显著性检验用One-way Annova分析;前后两个不同时间点的比较采用重复测量方差分析,当P＜0.05时,差异有统计学意义。结果:1.制备的复方颠倒散药物面膜为淡黄褐色、质地均匀、外观细腻及富有光泽感的一种O/W(水包油型)的剂型。2.制备的复方颠倒散药物面膜,经耐热、耐寒、室温贮存及离心试验,均无出现油相与水相分离现象,无变粗,无色泽改变,无沉淀及药物析出;PH计测定面膜膏体的PH值为5.35±0.12。3.实验豚鼠150只,兔子8只,均进入结果分析。复方颠倒散药物面膜的皮肤毒理学研究显示:在有效观察时间范围内①单次给予受试物后,2周内各组豚鼠无1例死亡。高、中、低剂量组与对照组相比以及完整皮肤与破损皮肤相比,皮肤、粘膜、饮食均无变化,各系统亦无异常变化。②连续给予受试物60天后,各组豚鼠均未见死亡。与对照组相比,高剂量组、中剂量组和低剂量组豚鼠的体重、精神、饮食情况以及皮肤粘膜均未发现异常表现,各系统及四肢活动亦无异常。末次给药后24小时血液学、血液生化学检查结果各组间均无显著性差异(P＞0.05)。各脏器病理学检查结果:脏器表面光滑,组织结构排列有序,细胞大小正常,胞浆、胞核着色均无异常。皮肤组织学检查结果:表皮、真皮及皮下组织结构完整,无变性、坏死,也无中性粒细胞浸润和血管内皮细胞损伤。③复方颠倒散2g外用时,与对照区相比,家兔无论完整皮肤区还是破损皮肤区差异均无显著性,既无红斑形成,也无水肿出现。试验结果表明,复方颠倒散药物面膜对家兔的完整皮肤及破损皮肤均无刺激性。④按皮肤过敏反应评分标准和致敏率分类来判断,复方颠倒散药物面膜组与空白对照组的豚鼠脱毛区皮肤6～72小时未见明显红斑、水肿等症状,也未见哮喘、休克等严重的全身过敏反应。阳性对照组给药后皮肤均有不同程度的红斑、水肿形成,按照评分标准为2.9分,致变态反应率为100%,24,48,72小时后皮肤仍有红斑、水肿出现。试验结果说明,复方颠倒散面膜及其基质对皮肤均无致敏性。4.该面膜对粉刺、丘疹、脓疱的皮损改善效果优于对照组(维胺酯维生素E组),对痤疮患者的总有效率为86.5%,并且不良反应较少,其疗效也优于对照组,因此该面膜对痤疮患者具有良好的效果,尤其适合于轻中度痤疮患者的治疗。并且不良反应较少。结论:1.复方颠倒散药物面膜制备工艺简单,质量稳定可靠。2.本项实验研究表明,在有效观察时间和一定剂量范围内,复方颠倒散药物面膜对实验动物均无严重系统吸收毒性,无皮肤致敏性,具有质地均匀、外观细腻、易于涂布、药物透皮吸收好等优点。3.复方颠倒散药物面膜具有较好的临床疗效,适合于轻中度患者的治疗。