目的：探讨壬基酚对体外培养Leydig细胞睾酮合成及其关键酶3β-HSD、P450scc的影响。方法：建立体外培养大鼠Leydig细胞的原代培养方法,染壬基酚(0、0.1、1、10μmol/L)24h后,ELISA方法检测细胞培养上清液中睾酮、细胞内P450scc、3β-HSD的含量,并运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测Leydig细胞P450scc、3β-HSD mRNA的表达水平。结果：与对照组相比,在设计剂量范围内,随着染壬基酚剂量加大,细胞培养上清液中睾酮的含量逐渐降低,1、10μmol/L时,有统计学意义,p<0.05。细胞内3β-HSD含量不断降低,1、10μmol/L,细胞内该酶的降低有统计学意义,p<0.05。3β-HSD mRNA的表达水平降低,10μmol/L时,有统计学意义,p<0.05。细胞内P450scc的含量及P450scc mRNA的表达水平均随染壬基酚剂量升高而不断升高,10μmol/L时,有统计学意义(p<0.05)。结论：体外培养Leydig细胞染壬基酚后,可以降低睾酮合成,当壬基酚10μmol/L以上时,降低了3β-HSD基因表达及蛋白合成,该机制可能为壬基酚抑制Leydig细胞合成睾酮的机制之一。