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[目的]研究雷公藤甲素(TPL)在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞系中对Wnt信号通路是否有影响,如果有影响则其中可能的机制是什么。[方法]1.利用Cell Counting Kit-8方法检测TPL对T-ALL细胞系的细胞活性影响。2.利用Western blot方法检测TPL对T-ALL细胞系jurkat和molt4中Wnt信号通路下游b-catenin、靶蛋白C-MYC及甲基化转移酶DNMT1、DNMT3A的影响。3.RT-PCR方法检测TPL处理前后T-ALL中Wnt信号通路下游转录因子TCF7、靶基因C-MYC、抑制因子WIF1、SOX17、CDH1、SFRP5及甲基化转移酶DNMT1、DNMT3A的表达水平。4.甲基化特异性PCR方法检测TPL处理前后T-ALL细胞系jurkat和molt4中WIF1、SOX17、CDH1及SFRP5的甲基化状态。[结果]1.通过检测TPL作用前后T-ALL细胞系jurkat和molt4的细胞活性,发现两个细胞系的活性在药物作用后均明显下降,并且随着TPL浓度的增加或作用时间的延长下降趋势越明显。2.通过检测TPL作用前后T-ALL细胞系中WNT信号通路中关键因子b-catenin、靶基因C-MYC及DNA甲基化转移酶DNMT1、DNMT3A在蛋白水平的表达,发现药物作用后它们的表达均为下降趋势。3.通过检测TPL作用前后Wnt信号通路相关基因在转录水平的变化,发现药物作用后该通路抑制因子WIF1、SOX17、CDH1、SFRP5均上升,该通路下游转录因子TCF7、靶基因C-MYC均为下调趋势,甲基化转移酶DNMT1、DNMT3A为下降趋势。4.通过检测TPL作用前后T-ALL中WIF1、SOX17、CDH1、SFRP5的甲基化状态,发现除WIF1、CDH1、SFRP5的非甲基化的形式表达均有所增加,但是未检测到SOX17基因的非甲基化形式有明显变化。[结论]TPL对急性T淋巴细胞白血病细胞系有杀伤作用,其可能的机制是通过上调对Wnt有抑制作用的SOX17、SFRP5、CDH1及WIF1的表达,从而抑制该细胞系中的Wnt通路。其中SFRP5、CDH1及WIF1的上调可能的机制是TPL改变了这三个基因的甲基化状态,非甲基化的形式表达增加,从而使这些基因的表达上升。但SOX17基因的甲基化状态在TPL作用后并无明显的改变,说明TPL对该基因的上调可能还涉及到其它的机制。