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牙周炎可导致牙槽骨、牙骨质和牙周膜等组织成分的破坏，是成人牙齿丧失的主要原因之一。牙周优势菌的内毒素是公认的炎症启动因子，在牙周炎发病中的作用越来越受到重视。而牙周膜主要由牙周膜细胞和胶原纤维组成，牙周膜细胞具有多向分化潜能，不仅对牙周组织的形成、代谢和功能维持有重要作用，并具有一定的免疫细胞活性。本研究通过细胞培养技术和酶动力学方法，观察了内毒素对人牙周膜细胞的某些细胞生物学功能影响，并利用免疫组化方法检测了内毒素对人牙周膜细胞中内毒素受体--mCD14表达的影响，初步评价了内毒素在牙周炎中的局部作用。 1、内毒素对人牙周膜细胞增殖的影响 采用细胞培养技术和四唑盐比色法，观察了内毒素对人牙周膜细胞增殖的影响。结果表明，牙龈卟啉菌、中间普氏菌、具核梭杆茵、大肠杆菌的内毒素在10ug/ml、100ug/ml的高浓度时，可显著抑制牙周膜细胞增殖，而在低浓度0.01ug/ml、0.1ug/ml时，则促进牙周膜细胞增殖。说明内毒素对体外培养的人牙周膜细胞的抑制作用主要和内毒素的浓度有关，不同来源内毒素差异并不显著。 2、内毒素对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的影响 利用酶动力学方法，探讨了在内毒素作用下，人牙周膜细胞中碱性磷酸酶活性的变化。结果显示，四种内毒素在三种不同浓度时均可降低牙周膜细胞中碱性磷酸酶活性，其抑制作用呈浓度依赖性。表明内毒素可能通过诱导牙周膜细胞表型改变，抑制牙周膜细胞的分化而影响牙周组织的再生和修复过程。 第四军区人学硕士学仲论文 3、内毒素对人牙周膜细胞产生IL6、＊N卜。的影响 通过细胞培养技术和 ELISA方法，观察牙周膜细胞在内毒素刺激下产生 IL6和 TNF。的能力。研究表明：内毒素可刺激牙周膜细胞产生＊－6和 TNF－o，在孵育 6h后，即可在培养上清中检测到 IL－6和 TNF－a；在uh或2仆内呈时间－依赖性方式升高。说明牙周膜细胞可能通过这种自分泌作用参与了牙周炎的发生、发展过程。 4、内毒素对人牙周膜细胞 mCD表达的影响 应用细胞培养技术和免疫组化方法，观察了牙龈叶咐菌的内毒素对人牙周膜细胞中mCD14表达的影响，揭示了mCD14在内毒素对人牙周膜细胞功能调节中的可能作用。本实验结果表明，正常牙周膜细胞中即有mCD的表达，牙龈叶琳菌的内毒素可增强其表达。 5、。CD在牙龈炎和牙周炎龈组织中的定位表达及意义 应用免疫组织化学SABC法，研究了人牙龈炎和牙周炎龈组织中mCD的表达情况及其意义。实验表明，健康牙龈组织中 mCD表达阴性；而边缘性龈炎和牙周炎龈组织中上皮棘层细胞的胞膜则有 mCD的表达。推测龈组织中 mCD阳性的细胞，可能在传递内毒素刺檄中具有一定的作用。