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目的:采用体外实验,研究磷酸肌酸钠(Creatine Phosphate Sodium,CP)对人卵巢癌细胞株skov3侵袭、迁移所产生的作用。观察磷酸肌酸钠对skov3细胞株侵袭、迁移影响的结果,探讨磷酸肌酸钠影响肿瘤细胞侵袭、迁移的可能机制,为应用该药物治疗化疗心脏毒性提供实验依据。方法:体外培养人卵巢癌细胞株skov3,分为空白对照组及不同浓度的药物处理组。取生长状态良好的对数期细胞,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT比色法)检测磷酸肌酸钠对人卵巢癌细胞株skov3黏附能力的影响;采用Transwell小室法检测磷酸肌酸钠对该细胞株迁移能力、侵袭能力的影响作用;采用流式细胞仪测定磷酸肌酸钠对该细胞株nm23-h1、c-myc、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平的影响;采用逆转录-聚合酶链反应(revers transcription PCR,RT-PCR)半定量检测磷酸肌酸钠对该细胞株nm23-h1、c-myc mRNA表达水平的影响。结果:MTT比色法分析检测黏附能力实验显示:skov3细胞株药物处理组(1、6、12mmol/L)与空白对照组相比,低浓度药物处理组OD值无显著变化,结果无统计学差异(P>0.05),中、高浓度药物处理组OD值均出现显著下降,结果有统计学差异(P<0.05),但中、高浓度药物处理组之间OD值无显著变化,结果无统计学差异(P>0.05);计算粘附抑制率分别为0%,0.72%±0.92%,36.47%±3.17%,37.06%±3.30%,低浓度药物处理组的细胞粘附抑制率较空白组无显著变化,结果无统计学差异(P>0.05),中、高浓度药物处理组的细胞粘附抑制率较空白组显著升高,结果有统计学差异(P<0.05),但组间无显著变化,结果无统计学差异(P>0.05);即中、高浓度药物处理组对skov3细胞株与细胞外基质成分Matrigel的粘附作用均有显著抑制。侵袭实验显示:skov3细胞株药物处理组(1、6、12mmol/L)与空白对照组比较,低浓度药物处理组穿膜细胞数较空白对照组无显著变化,结果无统计学差异(P>0.05),中、高浓度药物处理组穿膜细胞数量较空白对照组均显著降低,结果有统计学差异(P<0.05),但中、高浓度药物处理组之间穿膜细胞数量无显著变化,结果无统计学差异(P>0.05);计算侵袭抑制率分别为0%、3.06%±4.84%、34.87%±3.19%、37.67%±6.06%;即中、高浓度药物处理组对skov3细胞株的侵袭能力有显著性抑制作用。迁移实验显示:skov3细胞株药物处理组(1、6、12mmol/L)与空白对照组比较,低浓度药物处理组穿膜细胞数较空白对照组无显著变化,结果无统计学差异(P>0.05),中、高浓度药物处理组穿膜细胞数量较空白对照组均显著降低,结果有统计学差异(P<0.05),但中、高浓度药物处理组之间穿膜细胞数量无显著变化,结果无统计学差异(P>0.05);计算迁移抑制率分别为0%、2.32%±1.47%、31.50%±2.23%、33.51 %±2.90%;即中、高浓度药物处理组对skov3细胞株的迁移能力有显著性抑制作用。流式细胞仪测定细胞蛋白表达:skov3细胞株药物处理组(1、6、12mmol/L)采用流式细胞仪测定结果,以荧光指数(FI)表示四种蛋白表达的相对含量。所有样品检测均以0mmol/L为空白对照组,计算各样品FI值。nm23-H1的FI值分别为1、1.00±0.07、1.27±0.07、1.28±0.05;c-myc的FI值分别为1、1.00±0.04、0.87±0.01、0.85±0.03;MMP-2的FI值分别为1、0.99±0.04、0.98±0.06、0.98±0.03;MMP-9的FI值分别为1、1.01±0.03、0.99±0.03、0.98±0.05;即中、高浓度药物处理组skov3细胞株nm23-h1蛋白的表达水平与空白对照组相比显著升高,结果有统计学差异(P<0.05);中、高浓度药物处理组skov3细胞株c-myc蛋白的表达水平与空白对照组相比显著降低,结果有统计学差异(P<0.05);但各浓度药物处理组skov3细胞株MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平与空白对照组相比均无显著变化,结果无统计学差异(P>0.05)。半定量RT-PCR检测结果显示:skov3细胞株药物处理组(1、6、12mmol/L)采用半定量RT-PCR检测nm23-h1、c-myc mRNA的表达水平,药物处理组与空白对照组均可见明显而清晰的特异性条带。应用美国FOTODYNE凝胶成像分析系统分析显示,反映nm23-H1 mRNA表达水平的nm23-H1/GAPDH值分别为0.41±0.02、0.42±0.02、0.63±0.04、0.65±0.03 ,反映C-myc mRNA表达水平的C-myc/GAPDH值分别为0.63±0.02、0.62±0.03、0.40±0.01、0.39±0.03;即中、高浓度药物处理组skov3细胞株nm23-h1 mRNA的表达水平与空白对照组相比显著升高,结果有统计学差异(P<0.05);中、高浓度药物处理组skov3细胞株c-myc mRNA的表达水平与空白对照组相比显著降低,结果有统计学差异(P<0.05)。结论:1一定浓度的磷酸肌酸钠具有抑制人卵巢癌细胞株skov3黏附、迁移、侵袭的作用。2一定浓度的磷酸肌酸钠可通过上调nm23-h1 mRNA和蛋白表达水平抑制人卵巢癌细胞株skov3黏附、迁移、侵袭。3一定浓度的磷酸肌酸钠可通过下调c-myc mRNA和蛋白表达水平抑制人卵巢癌细胞株skov3黏附、迁移、侵袭。4磷酸肌酸钠对MMP-2、MMP-9蛋白表达水平无显著影响。5磷酸肌酸钠对卵巢癌细胞株skov3的侵袭、迁移无促进作用,为应用该药物治疗化疗心脏毒性提供了实验依据。