论文部分内容阅读
目的:流行病学调查表明,恶性肿瘤死亡率位居全世界死亡疾病之首,故肿瘤是威胁人类生命健康的日益严重的疾病。而作为恶性肿瘤的一种特殊类型——脑膜癌病(meningeal carcinomatosis),是中枢神经系统转移癌的一种特殊类型,是恶性肿瘤广泛转移浸润蛛网膜下腔,而中枢神经系统实质本身无肉眼或显微镜可见的浸润病灶的一类非独立性病。在实体肿瘤患者中发生率约为5%,死亡率极高。它常发生于原发病灶出现症状之前,且临床表现无特征性,患者早期临床表现往往仅有脑膜刺激征和颅内压增高,随后可相继出现神经系统症状,甚至出现全脑症状。其中以脑膜刺激征最常见,故极易与脑膜炎相混淆而误诊,又称癌性脑膜炎。因其在颅内不形成实体肿块,所以影像学诊断困难,既往活体诊断率几乎为零。上述原因致使很多患者在确诊时往往已是疾病的晚期,失去了治疗的机会,给家庭和社会带来极大的危害。脑脊液细胞学的出现使脑膜癌病达到活体诊断水平,成为国内外诊断脑膜癌病的首选方法,脑脊液细胞学MGG染色即我们通常意义上的细胞学常规染色方法,但其仅依赖于细胞形态学变化,对于异型性不典型细胞易误诊漏诊,因此本研究把脑脊液细胞学癌胚抗原(CEA)免疫细胞化学染色与激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测技术应用于脑膜癌病诊断中来,以使脑膜癌病的诊断提高到分子水平,减少漏诊误诊。方法:河北医科大学第二医院神经内科2003年2月----2008年7月入院既在我院确诊患者,脑膜癌病组42例,均于入院后24～48小时内行腰椎穿刺术留取脑脊液,根据标本量多少,将MC患者CSF标本离心沉淀后分别进行进行迈格姬氏染色(42例)、CEA免疫细胞化学染色(29例)、免疫荧光双标记染色(17例),其中CEA免疫细胞化学染色与免疫荧光双标记染色分别设有对照组20例,与病例组同样方法收集标本染色。将迈格姬氏染色、CEA免疫细胞化学染色后的玻片至于光镜下观察,免疫荧光染色玻片置于激光共聚焦显微镜下观察,并对其进行定位、定性、定量分析及三维图像的重建。比较三种方法的敏感性、特异性及其优略性。结果:42例患者均经脑脊液细胞学检查发现肿瘤细胞,首次脑脊液细胞学检查阳性率为85.71%(36/42),其中29例患者结合CEA免疫细胞化学染色,阳性率为79.31%(23/29),17例经免疫荧光双标记染色,阳性率为76.47%(13/17),三者之间阳性率两两比较P>0.05。免疫荧光染色呈现胞核蓝色、胞浆胞膜红色者为脑膜癌病CEA阳性细胞;只有蓝色胞核,胞浆胞膜未显色者为脑膜癌病CEA阴性细胞或非脑膜癌病细胞;定量分析对照组细胞核DNA荧光值范围946.000-184.284 ,胞浆胞膜CEA荧光值范围360.686-90.321;MC组CEA(+)者细胞核DNA相对含量范围为2710.135-793.863,及CEA荧光相对含量范围为2104.515-853.274,与对照组比较均有非常显著性差异(P<0.01);MC组CEA(-)者细胞核DNA相对含量与对照组比较有非常显著性差异(P<0.01),CEA平均荧光值与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论1脑脊液细胞学MGG染色是目前诊断MC的主要基本手段。2脑脊液细胞学免疫细胞化学染色为MC定性诊断提供了有力佐证。3激光共聚焦显微镜与免疫荧光技术把MC的诊断提高到定性、定位与定量相结合的新水平,尤其定量分析显示MC患者细胞核DNA平均荧光值较非MC患者细胞核DNA平均荧光值具有成倍性差异,对MC患者免疫细胞化学染色肿瘤标记物阴性者具有诊断意义。4三种染色方法具有互补诊断价值。