兔脑一氧化氮合酶阳性神经元分布及一氧化氮合酶活性的研究

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本课题对各生长发育阶段家兔整个脑内NOS阳性神经元的分布、形态、结构特征以及NOS的活性变化规律进行了系统研究,另外还对NOS的两个亚型神经元进行了观察。实验一利用NADPH-d酶组织化学技术,对NOS阳性神经元在兔脑的总体分布规律及其衰老性变化进行了系统研究,结果表明:①NADPH-d阳性神经元分布于兔脑各个部位,几乎涉及所有区域:包括小脑、大脑皮质、丘脑下部、中脑、脑桥和小脑,而延髓分布较少。②NADPH-d阳性神经元呈蓝色,细胞核不着色,神经元大多呈多角形、梭形;还有一些呈圆形和卵圆形等,而且突起染色都很清晰。③本实验结果表明,随着日龄的增加,兔脑NADPH-d阳性神经元经历了由小到大,形态日趋成熟,直至衰老,密度逐渐降低的变化过程。同仔兔、幼年兔、青年兔相比,成年兔NADPH-d阳性神经元的数量、胞体直径、突起形状没有显著变化,但老年组家兔阳性神经元的数量有较大程度的减少,细胞形态发生了变化,这表明NOS与神经元的衰老有关。实验二利用免疫组织化学SABC法,对nNOS阳性神经元在兔脑的分布规律及其衰老性变化进行了系统研究,结果表明:①家兔脑的各个区域均有丰富的nNOS阳性神经元和神经纤维出现,其中,nNOS免疫阳性神经元在大脑皮质、小脑、中脑、脑桥以及丘脑下部分布广泛而且数量较多,延髓较为稀少。②nNOS阳性神经元呈棕褐色,着色主要位于胞浆内,细胞核处染色较为浅淡;神经元胞体形态多种多样,有三角形、圆形、椭圆行、梭形等多种形状,神经元突起有一个或者数个;nNOS阳性纤维大多呈棕色串珠样,有些区域nNOS阳性纤维交错分布,相互交织成网状。③本实验结果表明,nNOS免疫阳性神经元的发育水平在仔兔就已接近成年兔水平,1岁龄以后逐渐发生衰老变化,即密度变小,表达强度减弱。结果提示nNOS免疫阳性神经元及其生成的NO在家兔神经系统的发育以及神经调控中起重要作用。实验三利用免疫组织化学SABC法,对eNOS阳性神经元在兔脑的分布<WP=6>规律及其衰老性变化进行了系统研究,结果表明:①家兔脑有比较丰富的eNOS阳性神经元和神经纤维出现,其中,eNOS免疫阳性神经元在间脑、大脑皮质、小脑分布广泛而且数量较多,脑干分布较为稀少,基本呈阴性。②eNOS阳性神经元呈棕褐色,免疫阳性物质主要位于胞浆内,胞浆染色均匀,胞核处着色浅;神经元胞体形态各异,有圆形、卵圆形、椭圆等多种形状,神经元突起有一个或者数个,轴突较短。③ eNOS免疫阳性神经元的发育水平在仔兔已接近或达到成年兔水平,成年后逐渐呈现衰老变化,表达强度减弱。实验四利用生化检测技术,对各年龄段家兔各部脑组织NOS的活性进行了检测,并做了对比。结果表明:每个年龄组脑各部分的NOS活性大小比较如下:小脑>间脑>脑干>大脑皮质,以小脑中NOS活性最高。兔脑中NOS活性随家兔的衰老而降低,但不同部位降低的时间段有所差异。
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