两株真菌的次级代谢产物研究

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微生物次级代谢产物与人类健康息息相关。自发现青霉素和链霉素以来,微生物来源的天然产物一直被认为是重要的药源分子资源库。慢性炎症可以引起气喘、动脉粥样硬化,甚至是癌症等多种重大疾病。因此深入发掘和筛选具抗炎活性的天然产物已成为天然药物化学的研究重点。本课题组在前期工作中从传统中药红花青藤中分离得到一株内生真菌Phomopsis sp.S12,并从其发酵浸膏中分离得到具抗炎活性的天然产物。本文以S12菌株为研究对象,基于“一株菌多种天然产物(OSMAC)”原则,对其次级代谢产物进行了进一步的分离鉴定。同时对其二萜类次级代谢产物的生物合成进行了初步研究。利用硅胶柱层析、薄层色谱层析、ODS反相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、高效液相色谱等技术,综合运用光谱学(紫外光谱、高分辨质谱、核磁共振波谱、圆二色谱、X射线单晶衍射等)手段,共分离鉴定化合物13个,其中新化合物7个,对部分化合物进行了抗炎活性测试。相关结果如下:使用优化的麦芽汁培养基(modified ME)对Phomopsis sp.S12进行大规模发酵,从其发酵浸膏中分离获得10个海松烷骨架的二萜化合物(1-10),其中7个为新化合物(1-7),化合物1的绝对构型由X射线单晶衍射确定。对该菌株进行了全基因组测序,推测了该类化合物的生物合成途径,并使用化学方法合成二萜的前体GGPP。进一步分析该菌基因组信息,发现其中蕴含丰富的次级代谢基因簇,而常规发酵条件下仅产生海松烷类二萜。我们通过筛选不同发酵条件,初步确定大米培养基可以诱导Phomopsis sp.S12生产聚酮化合物。对其发酵浸膏进行初步的分离,从中获得了 3个聚酮化合物(11-13)。对化合物1-3和8-10分别进行抗炎活性测试。结果表明,化合物3可以抑制LPS诱导的巨噬细胞中炎症因子的产生。从一株编号为Penicillium citrinum NF2240的真菌中的次级代谢产物中分离得到8个化合物,其中4个为甾体化合物(21-24),4个为聚酮类化合物(25-28)。此外,本文对微生物中萜类化合物的结构、活性及生物合成进行了综述。
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