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近年来研究显示,由于遗传因素、社会竞争压力的增加、吸烟、饮酒、滥用药物、人口老龄化等多种因素的作用,在我国,原发性高血压病(Essential hypertension,EH)的罹患人数越来越多,已经对人类的健康构成了非常严重的威胁,越来越受到社会的普遍重视。而高血压发展到后期会造成左室心肌肥厚(Left Ventricular Hypertrophy,LVH),这也被认为成导致心血管系统疾病的重要危险因素。肾素-血管紧张素系统(Rennin-Angiotensin system,RAS)在体内的活化被认为是引发心室肥厚的众多原因之一。肾素原受体((pro)renin receptor,(P)RR)作为RAS家族中的一员,在高血压心肌肥厚的发生发展的过程中扮演了什么角色呢?目的以自发性高血压大鼠(Spontaneous Hypertension Rats,SHR)为模型,观察肾素原受体((Pro)renin receptor,(P)RR)在自发性高血压大鼠心肌组织中的蛋白表达水平以及与心肌肥厚之间的关系,探讨(P)RR在自发性高血压大鼠心肌肥厚、心肌重构中的作用机制,为高血压及心肌增生、肥厚的临床治疗与预防提供新的策略和实验理论根据。取材与方法高血压组患者的血压数据收集一年内(2018.01-2018.12)来我市中心医院门诊就诊和住院治疗的原发性高血压病患者100人,按照《中国高血压病防治标准(2010)》的标准,排除了各种原因所致的继发性高血压患者。另外随机选取血压正常的成年人100人作为对照组检测并记录血压数据。所有参与本实验的人员均获有知情权。所有采取的血样均在清晨(空腹超过8小时)采集,立即分离血浆样品并在-80℃冷冻保存,直到用于检测。我们选取10只(16周龄)的健康WKY大鼠(Wistar-Kyoto Rats,WKYR)作为正常对照组;另外选取20只自发性高血压大鼠(16周龄),随机分为两个组。第一组作为高血压对照组(10只);第二组作为给药组(10只):给予(P)RR抑制剂(prorenin receptor inhibitor,PRRI)灌胃给药(4g/kg/d),处理四周后,禁食12小时取血浆。采用无创性鼠尾动脉测压仪检测并记录大鼠的动脉血压数据。采用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试验检测血浆样本中可溶性的肾素原受体(soluble(P)RR,s(P)RR)。采用免疫印迹(Western blot)检测心肌细胞中基质金属蛋白酶类(Matrix metallo proteinases,MMP)的表达;检测(P)RR、胶原I型和Ⅲ型(CollagenⅠ、Ⅲ)以及增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)蛋白的表达。用Masson染色测定心肌细胞中胶原的蛋白浓度。结果1.临床高血压患者动脉血压(Blood Pressure,BP)的变化同对照组(100例)相比较,高血压组患者收缩压(161.6±12.72)mm Hg,明显升高(P<0.001);舒张压(96.5±5.504)mm Hg,显著高于正常对照组(P<0.01)。2.检测人血浆中s(P)RR的水平正常对照组血浆中s(P)RR的平均水平(22.2±4.1)ng/m L。同对照组(100例)相比较,高血压组患者血浆s(P)RR水平(26.4±5.3)ng/m L,明显升高(P<0.05)。3.(P)RR抑制剂对SHR动脉血压的影响检测发现,SHR收缩压水平(167.8±10.34)mm Hg明显高于WKYR(115.6±11.06)mm Hg(P<0.001);SHR舒张压水平(101.0±4.397)mm Hg显著高于WKYR(75.50±6.916)mm Hg(P<0.001);与SHR相比较,给予(P)RR特异性抑制剂(PRRI),SHR的收缩压水平下降至(138.4±18.41)mm Hg,舒张压水平下降至(91.80±3.521)mm Hg;给予(P)RR特异性抑制剂(PRRI)后的SHR,检测其收缩压和舒张压都有了显著的降低(P<0.01)。4.检测实验大鼠血浆中s(P)RR的水平WKYR组血浆中s(P)RR的浓度水平为(21.3±4.2)ng/m L。SHR组s(P)RR的水平为(29.4±6.1)ng/m L,明显升高(P<0.05)。与SHR相比较,给予(P)RR特异性抑制剂(PRRI),SHR的血浆中s(P)RR的浓度水平为(24.5±5.4)ng/m L,较SHR组有显著的降低(P<0.01)。5.SHR心肌细胞中(P)RR的蛋白表达显著增加与WKYR相对比,SHR中的(P)RR表达较之有明显升高(P<0.05)。6.(P)RR抑制剂(PRRI)对SHR心肌细胞中CollagenⅠ、CollagenⅢ、PCNA、MMP-2的蛋白表达的影响;PRRI明显减少SHR心肌组织中胶原纤维的含量与WKY大鼠比较,SHR心肌组织中CollagenⅠ(P<0.0001)、CollagenⅢ(P<0.05)及PCNA(P<0.01)的蛋白表达水平均显著升高;与SHR对照组比较,(P)RR抑制剂给药组显著降低了SHR心肌组织中CollagenⅠ(P<0.01)、CollagenⅢ(P<0.01)及PCNA(P<0.01)蛋白的表达。SHR心肌细胞中基质金属蛋白酶(MMP-2)的表达较WKY大鼠有明显升高(P<0.001);(P)RR抑制剂给药以后能够显著减少SHR心肌细胞中MMP-2的表达(P<0.01)。Masson染色实验结果表明,与WKY大鼠组相比较,SHR心肌组织中胶原纤维含量明显增加。与SHR相比较,给予(P)RR特异性抑制剂(PRRI),SHR心肌组织中胶原纤维含量有了显著降低。7.MAPK信号可能参与了(P)RR诱导的SHR心肌重构(P)RR激活作用于MAPK p38-热休克蛋白27系统和PI3K-p85通路。(P)RR能够单独引起ERK1/2的活化。ERK1/2主要在心脏成纤维细胞中分布,是MAPK介导的多种通路其中之一。我们检测到在SHR组中,ERK1/2蛋白在心肌细胞中呈过度表达(P<0.05),其磷酸化水平明显升高。给予(P)RR特异性抑制剂(PRRI)后,ERK1/2在SHR心肌细胞中的表达有了显著降低(P<0.01)。据此,我们可以推测,MAPK信号可能参与了(P)RR诱导的SHR心肌重构。结论1.SHR大鼠心肌组织(P)RR蛋白表达明显增加,可能参与了SHR心肌重构发生发展的过程;2.(P)RR高表达促进SHR心肌重构可能是由MAPK信号通路来介导的。