杨梅果实黄酮糖苷类物质分离纯化及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

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本文以杨梅(Myrica rubra Sieb. et Zucc.)果实为材料,评价了19个品种果实提取物的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性,分离纯化了主要黄酮糖苷类化合物,并对不同产物进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化评价。主要结果如下:不同品种果实提取物对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性有显著差异。在终浓度为5 mg/mL时,‘木叶’果实提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率为83.95%,‘丁岙’的抑制率仅为40.57%。受试的19个品种中,‘木叶’、‘荸荠’、‘晚稻’等12个品种的α-葡萄糖苷酶抑制活性IC50在2.12-2.90 mg/mL之间;‘小叶细蒂’、‘早炭梅’和‘丁岙’等7品种的α-葡萄糖苷酶抑制活性IC50在3.12-7.86mg/mL之间。α-淀粉酶抑制活性分析表明,在终浓度为10 mg/mL时,受试的19个品种中,‘浪荡子’‘早炭梅’和‘丁岙’的α-淀粉酶抑制率较低,仅17.41-23.23%,其余品种的α-淀粉酶抑制率均大于50%,抑制率在54.62-71.27%。利用固相萃取柱和半制备高效液相色谱联用技术,建立了从‘荸荠’果肉中快速有效分离矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)、杨梅苷、金丝桃苷和槲皮苷等四种黄酮糖苷类化合物的纯化体系。经C18 Sep-Pak(?)固相萃取柱分离后得到富含C3G的10%分段组分和富含黄酮醇的50%分段组分,C3G纯度由0.74%增加至54.12%,杨梅苷、金丝桃苷和槲皮苷纯度分别由0.02%、0.06%和0.03%增加至2.42%、7.75%、3.84%,回收率均在70%以上;经半制备高效液相进一步纯化后,C3G的纯度达到了99.17%,杨梅苷、金丝桃苷和槲皮苷的纯度均在90%以上。对杨梅不同品种的固相萃取分段提取物及纯化后的4种黄酮糖苷类单体进行了a-葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化研究。结果表明,不同杨梅的50%分段提取物均具有远高于阳性对照阿卡波糖的α-葡萄糖苷酶抑制活性;C3G、杨梅苷、金丝桃苷和槲皮苷四种黄酮糖苷类化合物单体均具有显著的α-葡萄糖苷酶抑制活性;在终浓度为2 mg/mL时,C3G对α-葡萄糖苷酶抑制率为65.41%,杨梅苷、金丝桃苷、槲皮苷对α-葡萄糖苷酶抑制率分别为83.60%、78.59%、73.20%;此外,‘荸荠’果实粗提物的抗氧化活性与四种黄酮糖苷含量呈显著正相关关系。
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