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哺乳动物的海马位于脑颞叶内,是组成中枢神经系统的一部分,在日常学习和记忆形成等生理过程中起到重要作用。亚硝酸盐作为食品添加剂,人们在日常生活接触的机率较高,并且,亚硝酸盐作为小分子物质,可透过胎盘屏障,会对胎儿产生影响。基于海马重要的生理功能,我们对孕期亚硝酸盐暴露是否会对仔鼠海马造成损伤进行了研究。同时,在建模的过程中,通过实验手段探讨了亚硝酸盐的不孕效应。目的:①探讨孕期亚硝酸盐暴露对仔鼠海马损伤的作用;②探讨亚硝酸盐的不孕效应。方法:①孕期亚硝酸盐暴露模型的建立:将孕鼠分为对照组(生理盐水)、低剂量亚硝酸盐组(60 mg/kg)和高剂量亚硝酸盐组(120 mg/kg)。收集P0(postnatal day 0)、P7(postnatal day 7)、P14(postnatal day 14)、P30(postnatal day 30)各年龄点仔鼠大脑,用于免疫组织荧光染色、彗星实验、Western blotting蛋白半定量分析,以对海马损伤进行研究;②雌鼠亚硝酸盐暴露模型的建立:将雌鼠也分为对照组、低剂量亚硝酸盐组、高剂量亚硝酸盐组,然后对亚硝酸盐暴露后雌鼠的不孕率进行统计;收集对照组和暴露组卵巢,用HE染色法观察卵巢内部结构及各级卵泡数目的变化;用TUNEL试剂盒和Western blotting蛋白半定量分析对卵泡内颗粒细胞凋亡进行检测。结果:①孕期亚硝酸盐暴露对仔鼠海马损伤的影响:不论是暴露组还是对照组,仔鼠齿状回增殖的神经干细胞数目均随着年龄的增长逐渐减少;在P0、P7、P14和P30年龄点,暴露组仔鼠增殖的神经干细胞的数量明显比对照组少,且具有剂量依赖性(P<0.05,n=96),为了鉴别这种抑制作用是否具有选择性,我们对P0仔鼠室管膜下区神经干细胞的增殖情况进行了观察,结果发现暴露组室管膜下区的神经干细胞增殖较对照组也减少,同样具有剂量依赖性(P<0.05);暴露组仔鼠发生了氧化应激且门区凋亡细胞的数目比对照组多,具有剂量依赖性(P<0.05);彗星实验结果显示:暴露组P0仔鼠海马细胞的彗尾比对照组长,具有剂量依赖性(P<0.01);与对照组P0仔鼠相比,暴露组仔鼠海马组织内Caspase 8和NF-κB蛋白的表达量较高(P<0.05);②亚硝酸盐暴露的不孕效应:亚硝酸盐暴露可致不孕且具有剂量依赖性(P<0.05,n=66);亚硝酸盐暴露可诱导机体产生氧化应激反应、可使卵泡内颗粒细胞凋亡增加(P<0.01,n=20)。结论:①孕期亚硝酸盐暴露可通过诱导氧化应激、抑制神经干细胞增殖、促进细胞凋亡而对仔鼠海马造成损伤。②亚硝酸盐可通过促进颗粒细胞凋亡引起卵泡闭锁进而导致雌鼠不孕。