目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂SBHA（Suberic bishydroxamate/Suberoylbishydroxamic acid）对MCF-7、MDA-MB-231人乳腺癌细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用及其与蛋白酶体抑制剂Bortezomib或MG -132的协同作用,并进一步在MCF-7细胞中探讨SBHA单药及联合用药的分子机制。方法:首先采用不同浓度梯度或不同时间梯度SBHA单药处理乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231。采用WST方法和Annexin V/PI双染色流式细胞术检测经不同的SBHA单药处理后MCF-7、MDA-MB-231的生长情况及凋亡率,同时在显微镜下观察细胞形态变化并拍照。采用Hoechst33258染色,在荧光显微镜下观察细胞核形态变化。流式细胞术分析SBHA单药处理后细胞周期变化。为了进一步研究SBHA与蛋白酶体抑制剂的联合作用,将细胞按照药物处理方式分为（1）对照组;（2）SBHA组;（3）Bortezomib组;（4）SBHA+Bortezomib组;（5）MG-132组;（6）SBHA+MG-132组。采用WST方法、平板集落形成法和Annexin V/PI双染色流式细胞术检测上述不同药物处理对MCF-7、MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖能力的影响和凋亡诱导的作用。同时我们分别采用琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术分析MCF-7细胞经上述不同组处理后DNA片段及细胞周期的变化。然后,我们采用RT-PCR及Western Blot分析上述不同组药物处理72小时后MCF-7细胞株中p21、p27、p53、Bcl-2家族成员（bcl-2、Bax、Bcl-Xs、Bim、Bak）、smad通路（smad2、smad4、CTGF）及JNK/c-Jun通路（JNK、p-c-Jun、c-Jun）的变化。结果:WST法和流式细胞术检测结果示SBHA单药对MCF-7、MDA-MB-231细胞均有增殖抑制和凋亡诱导作用,且随着药物浓度增加和时间延长而增强,并引起细胞周期G₀-G₁期阻滞。相差显微镜下见细胞形态发生明显变化,浆核比例缩小,荧光显微镜下观察见典型的凋亡小体。SBHA联合Bortezomib或MG-132对MCF-7、MDA-MB-231细胞的生长抑制及凋亡诱导作用明显增强,联合系数小于1。琼脂糖凝胶电泳可见不同药物处理组均有DNA梯状条带。SBHA联合Bortezomib或MG-132主要引起细胞周期G₂-M期阻滞。采用SBHA单药稍升高p27mRNA水平,明显上调与细胞周期相关的p21、p27、p53蛋白的表达,SBHA联合Bortezomib或MG-132后进一步上调p21及p53的表达,p27蛋白未见进一步上升。SBHA与Bortezomib/MG-132联合后smad4 mRNA表达水平见升高,同样smad 2略有升高。SBHA单药时smad信号通路下游基因CTGF表达水平稍升高,与MG-132联合后明显上升。SBHA单药下调Bcl-2基因转录及蛋白水平表达,联合用药后下调更明显。SBHA单药及联合用药明显上调Bax、Bcl-Xs、SBHA单药明显上调Bim蛋白表达,联合用药后Bim表达水平较单药时下降。SBHA与Bortezomib/MG-132联合后上调JNK及磷酸化c-Jun蛋白水平的表达。结论:SBHA单药能够以剂量依赖和时间依赖方式抑制人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的增殖并诱导凋亡,引起细胞周期G₀-G₁期阻滞。SBHA与Bortezomib或MG-132协同抑制MCF-7和MDA-MB-231的生长并诱导凋亡,引起细胞周期G₂-M期阻滞。SBHA单药或与Bortezomib或MG-132联合可通过上调与细胞周期相关的p21、p27、p53蛋白水平,抑制细胞生长;可能通过调节Bcl-2家族蛋白表达（下调Bcl-2、上调Bax、Bcl-Xs及Bim）,恢复smad通路（上调smad2、smad4、CTGF）及激活JNK╱c-jun通路（上调JNK及磷酸化c-Jun）诱导细胞凋亡。总之,在乳腺癌细胞中,SBHA单药或与其他药物联合可能通过多种信号通路影响细胞周期进程,诱导细胞凋亡,从而抑制细胞生长。