应用Dot-PPA-ELISA检测猪巴氏杆菌病抗体的研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoliang668
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本研究提取猪巴氏杆菌菌株的荚膜和外膜蛋白抗原,首次建立了检测猪巴氏杆菌病血清抗体的Dot-PPA-ELISA方法。本研究确定了抗原的最佳包被浓度为7.76ug/ml,酶标SPA的最佳稀释倍数为1:10。经动物试验初步确定了该方法的阳性标准。试验证明所建立的Dot-PPA-ELISA具有较好的特异性,与猪瘟、仔猪副伤寒、猪丹毒、猪细小病毒病、猪伪狂犬、猪布氏杆菌病、猪衣原体病阳性血清无交叉反应。试验所建立的Dot-PPA-ELISA灵敏度高,与琼扩试验比较,敏感度提高约128倍。诊断膜片具有很好的稳定性,4℃保存5个月,室温保存3个月,其特异性,灵敏度不变。本试验建立的Dot-PPA-ELISA方法操作方便、快速,结果客观、易于判定,重复性好,所用的相关试剂可以标准化。适用于养猪场猪巴氏杆菌病的诊断、免疫后抗体监测以及流行病学调查。
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