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目的:通过对一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)及转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)在甲状腺功能亢进症(简称甲亢,Hyperthyroidsm,TH)大鼠心肌组织中的表达及动态变化的观察,探讨以上因子在甲亢性心脏损伤发病过程中的作用及意义,以及它们之间的关系。方法:通过给予左甲状腺素钠(L-T4,商品名为优甲乐)连续灌胃的方法制作甲亢大鼠模型,期间所有大鼠均自由进食水,在25天、45天、60天分批宰杀对照组(分别为A1、A2、A3组)和甲亢组(分别为B1、B2、B3组),动态观察大鼠心肌组织的病理改变及损伤情况,并通过酶法测定心肌组织中NOS、NO的含量及免疫组化方法观察ET-1、TGF-β1的表达。结果:1症状及体征:对照组大鼠进食水情况、精神状态、大小便情况及日常活动均正常且三组之间无明显变化。对照大鼠平均体重稳定增加。甲亢组大鼠饮食、饮水较对照组明显增加,大便呈糊状,并含有不消化食物;毛色无光泽,大部分出现严重的脱毛现象;活动增加、惊恐躁动、易受激惹及肌肉细微震颤等,体重与同期对照组相比均显著减轻(P <0.05)。2甲状腺功能测定:甲亢组B1、B2、B3的FT3、FT4均较同期对照组显著升高(P<0.01),且随着病程的延长进行性升高, TSH均较同期对照组显著降低(P<0.01)并随着病程的延长进行性下降。3血生化检测结果:心肌酶:甲亢组大鼠CK、CK-MB、AST均较同期对照组显著升高(P<0.01),且随着病程的延长,呈进行性升高;LDH、α-HBDH在B1组较对照组升高,但无统计学意义,LDH在B2组较对照组显著升高(P<0.05),在B3组其升高更显著(P<0.01),α-HBDH只在B3组较对照组显著升高(P<0.05)。4心脏重量及心脏重量指数(心重/体重,HW/BW)的测定:甲亢组大鼠心脏重量在B1组较同期对照组有所增加,但无统计学意义,B2、B3组心脏重量较对照组显著增加(P<0.01);HW/BW在B1组较同期对照组显著增加(P<0.01),B2、B3组其变化更加明显。5心肌病理改变:光镜下观察:对照组大鼠心肌纤维排列规则,结构清晰,细胞核染色质均匀分布,核呈椭圆形,心肌细胞之间排列紧密,细胞核致密,大小形状规则,间质中血管壁细胞呈单层排列且规则;甲亢组大鼠心肌细胞排列紊乱,心肌细胞肥大,胞浆淡染,细胞核明显增大松散,细胞浊肿,心肌间结缔组织增生,心肌纤维有断裂现象,分支增多,间隙增宽,间质中血管壁增厚,中性粒细胞、淋巴细胞浸润,间质充血。6心肌组织中NOS、NO的测定:甲亢组大鼠心肌组织中NO、结构型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,cNOS)、诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)的表达在B1组较同期对照组无明显变化(P>0.05)。NO、cNOS从B2组起较对照组显著降低(P<0.01),且随病程延长进行性降低,iNOS从B2组起较对照组显著升高(P<0.05),B3组升高更明显(P<0.01)。7免疫组化测定结果:甲亢组大鼠心肌中ET-1的表达在B1组较同期对照组显著增强(P<0.05),B2、B3组时其改变更加显著(P<0.01);甲亢组大鼠心肌中TGF-β1的表达在B1组较对照组虽有所增强,但无统计学意义,B2、B3组较同期对照组表达显著增强(P<0.01)。8甲状腺功能与心肌酶,心脏重量及心肌组织中表达因子的直线相关分析结果:CK、CKMB、AST均与FT3、FT4呈显著正相关(P<0.01),与TSH呈显著负相关(P<0.01);LDH与FT3、FT4呈显著正相关(P<0.01),与TSH呈显著负相关(P<0.05),α-HBDH只与FT4呈明显正相关(P<0.05),而与FT3、TSH无明显相关性。HW/BW与FT3、FT4呈显著正相关(P<0.01),与TSH呈显著负相关(P<0.01)。NO、cNOS与FT3、FT4呈显著负相关(P<0.01),与TSH呈显著正相关(P<0.01);iNOS与FT3、FT4呈显著正相关(P<0.01),与TSH呈显著负相关(P<0.05)。ET-1、TGF-β1均与FT3、FT4呈显著正相关(P<0.01),与TSH呈显著负相关(P<0.01 )。9其他直线相关分析结果:CK、CK-MB、AST、LDH与ET-1、TGF-β1(平均灰度值)均呈显著负相关,α-HBDH与ET-1、TGF-β1均无相关性。HW/BW与ET-1、TGF-β1(平均灰度值)均呈显著负相关。NO、cNOS与ET-1、TGF-β1(平均灰度值)呈显著正相关,iNOS与ET-1、TGF-β1(平均灰度值)呈显著负相关;ET-1、TGF-β1之间存在显著正相关性(P<0.01)。结论:本实验通过给予左旋甲状腺素灌胃法建立甲状腺功能亢进大鼠模型,模型组灌胃后出现甲亢症状,同时甲状腺功能检查也符合甲亢的特点,并随着甲亢病程的进展,出现了心脏损伤,表现为心肌肥厚、心脏重量增加、HW/BW比值增加和心肌酶的升高。随着甲亢病程的延长,心脏损伤进行性加重,通过动态观察心脏组织形态、血清心肌酶学、心肌组织中NO、NOS、ET-1及TGF-β1的表达变化及相关分析,表明NO、NOS、ET-1及TGF-β1等因子在甲亢性心脏损伤的发生过程中起着重要的作用,且它们之间也存在着联系,使他们相互作用,共同促进病程的发展。