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目的:本实验通过检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)、葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)在结直肠癌、结直肠腺瘤及正常粘膜组织中表达水平,分析四者在结直肠癌组织中的相关性及与临床病理指标之间的关系,探讨各个因子在结直肠癌早期诊断及分子靶向治疗中的意义。方法:本实验应用免疫组化(IHC)观察三组不同结直肠组织中IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4四者蛋白染色情况,用光镜判断结果;应用蛋白印迹(Western Blot)方法检测三组不同结直肠组织中IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4四者的蛋白表达量;采用荧光定量PCR(qReal-time PCR,qRT-PCR)方法检测三组不同结直肠组织中IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4四者mRNA的表达情况。结果:1免疫组化(IHC)实验结果1.1 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4在结直肠癌、腺瘤及正常粘膜组织中的表达情况IGF-1、IGF-1R、GLUT-4在正常粘膜组织、结直肠腺瘤、结直肠癌中的阳性表达率逐渐升高,各组间差异有统计学意义(P<0.01);IGFBP-3阳性表达率逐渐降低,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。1.2 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4的表达与结直肠癌临床病理指标之间的关系IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4的表达均与患者的年龄、性别、分化程度等因素无关(P>0.05)。IGF-1、IGF-1R、GLUT-4在浸润超过肌层、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的结直肠癌组织中的阳性表达高于浸润未超过肌层、无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的结直肠癌组织(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。IGFBP-3在有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的结直肠癌组织中的阳性表达低于无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的结直肠癌组织(P<0.05,P<0.05),IGFBP-3表达水平与浸润深度无关(P>0.05)。2蛋白印迹(Western Blot)实验结果2.1 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4蛋白在结直肠癌、腺瘤及正常粘膜组织中的表达情况IGF-1、IGF-1R、GLUT-4蛋白在正常粘膜组织、结直肠腺瘤、结直肠癌中的相对表达量率逐渐升高,各组间差异有统计学意义(P<0.01);IGFBP-3蛋白的相对表达量逐渐降低,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。2.2 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4蛋白的表达与结直肠癌临床病理指标之间的关系IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4蛋白的表达均与患者的年龄、性别、分化程度等因素无关(P>0.05)。IGF-1、IGF-1R、GLUT-4蛋白在浸润超过肌层、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的结直肠癌组织中的相对表达量高于浸润未超过肌层、无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的结直肠癌组织(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。IGFBP-3蛋白在有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的结直肠癌组织中的相对表达量低于无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的结直肠癌组织(P<0.05,P<0.05),IGFBP-3蛋白的表达水平与浸润深度无关(P>0.05)。3实时荧光定量(QReal-Time PCR)实验结果3.1 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4mRNA在结直肠癌、腺瘤及正常粘膜组织中的表达情况IGF-1、IGF-1R、GLUT-4mRNA在正常粘膜组织、结直肠腺瘤、结直肠癌中的相对表达量率逐渐升高,各组间差异有统计学意义(P<0.01);IGFBP-3mRNA的相对表达量逐渐降低,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。3.2 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4 mRNA的表达与结直肠癌临床病理指标之间的关系IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4mRNA的表达均与患者的年龄、性别、分化程度等因素无关(P>0.05)。IGF-1、IGF-1R、GLUT-4mRNA在浸润超过肌层、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的结直肠癌组织中的相对表达量高于浸润未超过肌层、无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的结直肠癌组织(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。IGFBP-3mRNA在有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的结直肠癌组织中的相对表达量低于无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的结直肠癌组织(P<0.05,P<0.05),IGFBP-3mRNA的表达水平与浸润深度无关(P>0.05)。4结直肠癌组织中IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4的相关关系免疫组织化学、蛋白印记及实时荧光PCR三种实验方法检测结果一致:即IGF-1与IGF-1R呈正相关关系(r=0.412,P<0.01;r=0.573,P<0.01;r=0.536,P<0.01);IGF-1与IGFBP-3呈负相关关系(r=-0.604,P<0.01;r=-0.412,P<0.01;r=-0.513,P<0.01);IGF-1与GLUT-4呈正相关关系(r=0.396,P<0.01;r=0.568,P<0.01;r=0.658,P<0.01)。结论:1结直肠癌组织中IGF-1、IGF-1R、GLUT-4的表达水平明显高于结直肠腺瘤及正常粘膜组织,说明三个因子可能参与了肠粘膜的癌变过程;结直肠癌组织中IGFBP-3的表达水平低于结直肠腺瘤及正常粘膜组织,提示IGFBP-3高表达可能对结直肠癌的发展具有抑制作用。2 IGF-1、IGF-1R、GLUT-4在有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的结直肠癌组织中的表达水平高于无淋巴结转移、TNM分期为分Ⅰ&Ⅱ期的结直肠癌组织,提示IGF-1、IGF-1R、GLUT-4在结直肠癌的侵袭和转移方面起到一定的促进作用,IGFBP-3在有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的结直肠癌组织中的表达水平低于无淋巴结转移、TNM分期为分Ⅰ&Ⅱ期的结直肠癌组织,提示IGFBP-3高表达可能对结直肠癌的侵袭和转移具有抑制作用。3在结直肠癌组织中,IGF-1的表达水平与IGF-1R、GLUT-4的表达水平呈正相关关系,IGF-1的表达水平与IGFBP-3的表达水平呈负相关关系,提示IGF-1R、IGFBP-3、GLUT-4可能通过与IGF-1相互作用参与结直肠癌的发展。