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目的探讨高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)对伊马替尼耐药慢性髓细胞白血病(慢粒)细胞增殖和凋亡的影响及其与Bcl-6/p53通路的关系。方法(1)应用CCK-8技术检测伊马替尼耐药慢粒细胞系(K562/G01)的耐药特点;(2)应用 western blot 技术和荧光定量 PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)技术检测K562/G01细胞和慢粒急变期患者骨髓原代细胞中原癌基因Bcl-6蛋白表达水平和mRNA的表达水平;(3)应用CCK-8法和流式技术检测HHT处理前后K562/G01细胞增殖、凋亡及细胞周期的变化;(4)运用小干扰 RNA(small interfering RNA,siRNA)的方法下调 K562/G01 细胞 Bcl-6 的表达水平,以CCK-8技术检测siRNA干扰前后K562/G01细胞增殖活力的变化,运用流式细胞术检测干扰前后K562/G01细胞凋亡水平的变化,观察Bcl-6对K562/G01细胞增殖和凋亡的影响;(5)运用qPCR检测HHT处理前后多种细胞系(K562细胞、K562/G01细胞、SUP-B15细胞、KU812细胞、293T细胞)Bcl-6和p53 mRNA表达水平的变化;(6)运用western blot技术检测HHT处理前后上述细胞系(K562细胞、K562/G01细胞、SUP-B15细胞、KU812细胞、293T细胞)Bcl-6和p53蛋白表达水平的变化。结果(1)野生型慢粒细胞系K562的IC50为0.5 μ mol/L,伊马替尼耐药的慢粒细胞系(K562/G01)的IC50为9.5μmol/L,耐药倍数为19倍;(2)Western blot技术结果证实,与K562细胞相比较,K562/G01细胞中Bcl-6蛋白高表达;与慢粒慢性期患者相比,慢粒急变期患者骨髓单个核细胞Bcl-6蛋白高表达;(3)HHT可抑制K562/G01细胞增殖,促进其凋亡并可产生G0/G1期细胞周期阻滞作用;(4)siRNA可下调Bcl-6的表达水平并可抑制K562/G01细胞增殖和促进K562/G01细胞凋亡;(5)HHT处理之后,多种细胞系(K562细胞、K562/G01细胞、SUP-B15细胞、KU812细胞、293T细胞)Bcl-6蛋白表达水平下调,同时p53蛋白表达水平上调,两者均呈现剂量依赖性特征。结论伊马替尼耐药慢粒细胞系Bcl-6蛋白表达水平高于非耐药细胞慢粒细胞系K562,HHT可抑制K562/G01细胞增殖,促进K562/G01细胞凋亡并产生G0/G1期细胞周期阻滞作用,其作用机制是下调Bcl-6蛋白表达水平和提升p53蛋白表达水平。