实验动物作为人类疾病动物模型的研究对象,为人类疾病的发病机制、新药物或新兴治疗方法提供大量的研究数据,有效规避了人类实验风险和伦理限制,为人类生物医学发展做出不可磨灭的贡献。灵长类动物与人类之间的遗传信息与生理生化方面高度相似,是制作人类重大疾病模型的重要对象。灵长类动物遗传疾病模型的制作有赖于转基因技术和辅助生殖技术,通过体外受精、体外培养获得胚胎,将基因编辑载体注射入胚胎并实施胚胎移植获得基因修饰灵长类动物,这将对人类重大疾病研究和新药研发提供重要疾病模型。本实验研究,以食蟹猴为研究对象。通过腹腔镜手术收集超数排卵母猴的卵母细胞,电刺激法获得公猴精子,卵胞质内单精子注射（ICSI）受精获得胚胎。通过胚胎冷冻保存,以及胚胎注射基因修饰载体等实验过程,分析取卵后MI卵母细胞受精及其胚胎发育潜能;分析基因编辑猴冷冻-复苏精子与正常新鲜精子在胚胎发育潜能上的差异;分析原核时期基因编辑载体胞质注射和原核注射对胚胎发育的影响;分析早期胚胎遗传诊断技术中4～8细胞胚胎透明带切割对胚胎后续囊胚发育的影响,以及分析囊胚滋养层细胞取材后冷冻-复苏胚胎与对照组胚胎对比复苏率和着床率。多方面为食蟹猴辅助生殖技术的有效性和安全性做出评估,为培育基因编辑猴提供重要数据支持。研究结果如下:（1）MI,MI-MII和MII卵母细胞的ICSI受精卵的原核率、卵裂率和囊胚率,两两差异不显著。MI卵母细胞体外成熟后ICSI受精后胚胎的发育潜能与MII卵母细胞相当,但是MI卵母细胞直接ICSI受精的胚胎发育的潜能较其它组低。（2）SHANK3基因编辑猴冷冻-复苏精子与正常新鲜精子分别进行ICSI体外受精,冷冻-复苏精子受精后的胚胎在原核率、卵裂率和囊胚率的平均值均稍低于新鲜精子,但差异不显著;利用SHANK3基因编辑猴冷冻-复苏精子体外受精和胚胎移植已经成功获得子代。（3）冻精和鲜精ICSI受精卵在原核时期胞浆内注射基因编辑载体,除了冻精受精卵注射载体胚胎的囊胚率显著降低,其它组受精卵的卵裂率和囊胚率与对照组（未注射载体）差异均不显著。（4）4～8细胞时期胚胎透明带切割的PGD操作对胚胎囊胚形成无影响,且促使囊胚孵出。（5）冷冻-复苏囊胚移植成功妊娠并获得新生猴。冷冻-复苏胚胎的移植妊娠成功率与对照鲜胚的差异不显著,但是PGD胚胎冷冻-复苏的移植妊娠成功率较对照组显著降低。