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目的:通过RNA干扰技术转染人肝癌细胞株Bel-7402,进一步运用体外实验观察过表达UCHL1-AS1基因对肝癌细胞株增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的影响,最后运用生物信息学分析UCHL1-AS1相关蛋白及其蛋白作用网络。方法:1、按慢病毒转染说明书进行操作,对人肝癌细胞株Bel-7402进行UCHL1-AS1基因过表达转染,转染后用嘌呤霉素筛选稳定转染细胞株。将细胞分为三组,分别命名为实验组(LV-UCHL1-AS1)、阴性对照组(LV-NC)和空白组(Control)进行实验操作。qRT-PCR方法检测实验组、阴性对照组的转染效果。2、MTT法、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞技术比较各组细胞的凋亡情况;Transwell实验观察细胞运动能力。3、运用Starbase2.0在线软件分析UCHL1-AS1基因及UCHL1基因的相关蛋白,再通过STRING在线软件分析其蛋白基因的作用网络图,最后利用DAVID软件对网络图中相关基因进行KEGG通路分析和GO富集分析。结果:1、qRT-PCR方法检测细胞UCHL1-AS1基因在实验组的表达情况明显高于阴性组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2、MTT法结果显示实验组细胞生长速度慢于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。平板克隆形成实验显示,实验组细胞克隆形成率(8.0±1.7) %明显低于阴性对照组(18.7±1.8) %和空白组(19.13±1.19) %的克隆形成率,差异有统计学意义(F=47.201,P<0.001)。3、流式细胞技术结果,实验组细胞的凋亡率为(0.51±0.07) %,阴性对照细胞的凋亡率(0.87±0.2) %,空白组细胞的凋亡率(4.95±0.84) %,实验组和阴性对照组分别与空白组相比,差异具有统计学意义(F=72.323, P<0.001),实验组和阴性对照组相比,差异不具有统计学意义(P>0.05)。4、侵袭实验结果显示,实验组穿过聚碳酸酯膜的细胞数为(10±4.3个),空白组和阴性组分别为(86.3±5.5个)、(79.3±11.9个)。与其他两组细胞相比,实验组细胞的侵袭能力减弱,差异有统计学意义(F=83.605, P<0.001) 。5、迁移实验结果显示,实验组穿过聚碳酸酯膜的细胞数为(52.33±4.36个),空白组和阴性组分别为(97.11 ± 14.41个)、(87.78±4.76个)。实验组比其他两组细胞的侵袭能力减弱,差异有统计学意义(F=20.13, P=0.002)。6、Starbasev2.0在线软件分析结果显示,e1F4A111基因分别与UCHL1-AS1基因和UCHL1基因存在相互作用。7、STRING在线软件作e1F4A111基因和UCHL1基因的蛋白作用网络图结果显示:e1F4A1111、CWC22、UBC、UPF3A、MAGOH、CASC3、SMG1、UPF1、EIF4G1、RNPS1、UPF3B 基因存在相互作用;UCHL1、COPS5、CDKN2A、TP53、UBA52、UBC、USP21、UCHL1、KRT4、HSPA8、SP90AA1、SNCA基因存在相互作用。8、e1F4A111基因相关蛋白KEGG通路分析结果显示MAGOH、EIF4A3基因参与剪接体相关通路的过程,GO分析结果显示e1F4A111、CWC22、UBC、UPF3A、MAGOH、CASC3、SMG1、UPF1、EIF4G1、RNPS1、UPF3B 基因参与mRNA转录、mRNA核运输、细胞大分子分解过程等生物进程,定位于核浆和剪接体等细胞内,具有RNA结合、依赖ATP的解螺旋酶活性等分子功能。UCHL1、COPS5、CDKN2A、TP53、UBA52、UBC、USP21、UCHL1、KRT4、HSPA8、SP90AA1、SNCA 基因的 KEGG 通路分析显示参与膀胱癌、非小细胞肺癌、胶质瘤等疾病相关通路过程,GO分析结果显示这些基因参与蛋白去泛素化、转录调控、基因表达调控等生物进程,定位于细胞中的胞液、细胞器等部位,具备泛素巯基酯酶活性和硫醇酯水解酶活性等分子功能。结论:1.UCHL1-AS1基因可抑制人肝癌细胞株Bel-7402的增殖及侵袭迁移能力,对细胞株凋亡无明显影响。2. UCHL1-AS1基因和UCHL1基因分别与e1F4A111基因存在相关作用。3. e1F4A111基因与UCHL1基因分别同多个蛋白基因相互作用并构成网络图,对下游基因进行调控。4. e1F4A111基因网络图中的基因参与mRNA转录、mRNA核运输、RNA结合等过程,其中MAGOH、EIF4A3基因富集于剪接体的相关通路,参与生命体的遗传活动等。5.UCHL1基因网络图中的基因GO分析参与蛋白去泛素化、转录调控等过程,KEGG通路分析参与某些疾病相关通路。