穿心莲内酯对食管癌细胞ECA109的放疗增敏研究

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目的:研究穿心莲内酯对食管癌细胞ECA-109的放疗增敏作用。  方法:培养食管癌细胞ECA-109,通过MTT法检测穿心莲内酯对细胞生长的抑制;克隆集落形成实验观察穿心莲内酯的放射增敏作用;细胞划痕实验检测细胞增殖、迁移的情况;流式细胞仪检测细胞的凋亡和周期分布情况;免疫荧光实验观察促凋亡蛋白BAX的表达情况;western blot检测细胞内NF-κb,caspase3,bax,bcl-2的表达;γ-H2AX焦点形成检测DNA损伤情况。  结果:穿心莲内酯抑制食管癌细胞ECA-109的生长,并有明显的时间和剂量依赖性;通过单击多靶模型拟合曲线,可见低浓度穿心莲内酯预处理6h,相比单纯照射组可以增加ECA-109细胞的辐射敏感性(t=4.59,P<0.05),辐射增敏指数为1.28;药物联合放射可以明显影响食管癌细胞的增殖迁移能力;与单纯照射组相比,穿心莲内酯联合X射线照射组中的细胞凋亡率明显增加(t=4.74,P<0.05);穿心莲内酯作用于食管癌细胞,可以使凋亡相关蛋白caspase3、bax的表达升高,并且呈明显的量效关系,NF-κb表达趋势与bc卜2一致;相对于单纯照射组,穿心莲内酯与X射线联合作用能够增加DNA双链断裂数目。  结论:穿心莲内酯能够提高食管癌细胞的放射敏感性,机制可能与其增加食管癌细胞的凋亡率、调控细胞周期和调节细胞内的NF-κb的表达有关。
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