资源植物朝鲜槐的化学成分、生物活性及其质量控制研究

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朝鲜槐(Maackia amurensis Rupr.et Maxim.)为豆科(Leguminosae)马鞍树属(Maackia Rupr.et Maxim)植物,主要分布于我国东北,是东北植物区系豆科唯一古老的特有种。民间将其树皮作为祛风湿、镇痛、消炎和止血药,用来治疗肿瘤、胆囊炎、瘀血肿痛、风湿性关节炎、溃疡等症。国内有关朝鲜槐的化学成分及药理活性研究较少。为了开发利用这一民间药用植物资源,我们对辽宁产朝鲜槐树皮进行了化学成分、生物活性试验及其质量控制方面的研究。从朝鲜槐树皮70%的乙醇提取物中,经过多种色谱分离手段分离得到54个化合物,通过理化性质及波谱分析鉴定了这些化合物的结构,其中包括9个新化合物,分别命名为:怀槐二氢黄酮A(1,maackiaflavanone A),怀槐二氢黄酮B(2,maackiaflavanone B),怀槐异黄酮(3,maackiaisoflavone),怀槐紫檀烷A(4,maackiapterocarpan A),怀槐紫檀烷B(5,maackiapterocarpan B),怀槐异黄酮苷(15,Maackiaisoflavonoside),怀槐色原酮(39,maackiachromone),(2S,3S)-7-甲氧基二氢黄酮醇(41),(-)-怀槐金雀花碱(48,(-)-maackiacytisine);45个已知化合物:abyssinone V(6),(-)-sigmoidin E(7),5-hydroxysophoranone(8),maackiaflavanone(9),abyssinone II(10),abyssinone IV(11),euchrenone b1(12),ulexone B(13),ulexone A(14),Dalsympathetin(16),芒柄花苷(17),鸡黄豆素苷(18),染料木苷(19),Saikoisoflavonoside A(20),阿夫罗摩辛-7-O-β-D-呲喃葡萄糖苷(21),gehuain(22),Kushenol O(23),4’,6-二甲氧基-异黄酮-7-O-β-D-芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(24),鸢尾种苷(25),5-羟基-4’-甲氧基-异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(26),4’-甲氧基.异黄酮-7-O-β-D-芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(27),glycitin-6"-O-acetate(28),ononin-6"-O-acetate(29),7,5’-dihydroxy-3’-methoxyisoflavone(30),retusin-8-methylether(31),7,4’-dihydroxy-3’-methoxyisoflavone(32),di-O-methyldaidzein(33),染料木素(genistein,34),阿夫罗摩辛(afromosin,35),芒柄花黄素(formononetin,36),樱黄素(prunetin,37),鸡黄豆素(glycitein,38),(±)-2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-7-methoxyflavone(40),3,4-二甲氧基咖啡酸酯(42),高丽槐素(43)和美迪紫檀素(44),对羟基苯甲酸乙酯(45),对甲氧基苯甲酸(46),对羟基苯甲醛(47),金雀花碱(cytisine,49),(±)-formylcytisine(50),N-(3-oxobutyl)cytisine(51),(-)-epibaptifoline(52),N-methylcytisine(53)和β-谷甾醇(54)。其中化合物6,7,10—14,16,21—24,26-28,30,31,40,45—47等21个化合物为首次从马鞍树属植物中分离得到;化合物8,32为首次从朝鲜槐植物中分离得到。根据朝鲜槐树皮民间抗肿瘤功效,选择一些特征性成分进行了细胞毒活性筛选。采用MTT法测试7个异戊烯基二氢黄酮(1,2,6-9,11),3个异戊烯基异黄酮(3,12,14);3个紫檀烷(4,43,44);及具有代表性的异黄酮染料木素(34),对人宫颈癌HeLa细胞、人黑色素瘤A375S2细胞、人乳腺癌MCF-7细胞和人肝癌HepG2细胞的细胞毒活性,结果所有被测试化合物均显示不同程度的细胞毒作用,其中怀槐二氢黄酮B抑制A375S2细胞IC50值为7.8μM,euchrenone b1抑制HeLa细胞IC50值为4.5μM。我们还首次对1个异戊烯基二氢黄酮5-hydroxysophoranone(8),及2个紫檀烷:高丽槐素(43)、美迪紫檀素(44)进行了细胞色素P450氧化酶CYPlA2、CYP2C9、CYP3A4抑制活性筛选研究,结果均显示较强的抑制活性,其中(一)-medicarpin(44)抑制CYPlA2IC50值为10.7μM。为了控制朝鲜槐药材的质量,首次采用紫外分光光度法测定朝鲜槐树皮中总黄酮含量约7.0%。对朝鲜槐树皮药材进行了HPLC指纹图谱研究,首次建立了朝鲜槐树皮药材HPLC指纹图谱方法,以分离得到的化学对照品,对朝鲜槐药材指纹图谱中23个特征峰进行了标定,共指认了18个色谱峰,其中17个为异黄酮类化合物,并采用HPLC法对2批朝鲜槐树皮药材中4个异黄酮苷:染料木苷、鸢尾种苷、Saikoisoflavonoside A及新化合物怀槐异黄酮苷进行了含量测定,为朝鲜槐及其相关制剂的质量控制研究奠定了基础。
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