卵巢癌血管内皮细胞化疗敏感性相关基因的筛选

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背景与目的卵巢癌是死亡率最高的女性生殖系统常见恶性肿瘤,约30%-40%的患者经肿瘤细胞减灭术及多疗程化疗后仍有残留肿瘤灶或肿瘤进展,且在获得完全缓解的患者中,仍有半数以上在短期内复发或转移。因为肿瘤的化疗敏感性不但与肿瘤细胞本身的化疗敏感性相关,还与周围血供状态密不可分,本研究旨在探讨卵巢癌血管内皮细胞化疗药物处理后基因表达改变的情况,为调节卵巢癌的血管生成机制提供新的治疗方法。材料与方法使用免疫磁珠从卵巢癌新鲜组织中提取血管内皮细胞,经紫杉醇/卡铂化疗药物处理后,使用寡核苷酸微阵列筛选差异表达的基因,并且经实时定量PCR方法及Western-blot扩大样本验证这些基因的变化与紫杉醇/铂类化疗疗效的相关性。结果提取的卵巢癌血管内皮细胞体外培养生长良好,融合后呈铺路石样改变,有接触性抑制现象,经免疫荧光鉴定证实其表达内皮细胞特异性v WF因子。基因芯片技术检测显示,经紫杉醇/卡铂处理后从4组样本中共筛选出136个差异表达基因,其中57个为上调基因、79个为下调基因。上调基因超过5倍的包括MMP-9,SPP1,LOX和ESM1在内的9个基因。下调基因包括HMGB1,FOS,CAPG,EGFL6,TMEM101,CXCL1和COL3A1在内的7个基因。聚类分析显示差异表达的基因主要包括与细胞外基质功能、细胞周期调节、细胞黏附分子、MAPK信号通路、Toll-样受体信号通路相关的基因。经体外实验:PCR技术及Western-blot,基因芯片检测结果与PCR及Western-blot结果具有良好的一致性。结论卵巢癌血管内皮细胞经紫杉醇/铂类药物化疗后基因表达有显著差异,其中部分明显差异表达的基因可能为提高卵巢癌化疗敏感性及抗血管生成治疗提供新的治疗靶点。
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