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背景：性发育异常(Disorders of sex development, DSD)是指先天性的染色体性别、性腺性别、解剖性别(即表型性别)异常,包含一系列难以分类、难以诊断的复杂性疾病。其中绝大多数是因遗传物质的改变所致。根据染色体核型不同,可以分为性染色体DSD、46,XXDSD和46,XY DSD。46,XY DSD的遗传背景最为复杂,涉及的基因比46,XX DSD更多,目前已有20多种46,XY DSD的致病基因被克隆。在46,XY DSD中,肿瘤发生率最高的是46,XY女性,它涉及到X、Y染色体或常染色体上基因的突变,虽然这些患者一般不会有自身配子的后代,即无后代的患病风险,但患者发育不良的性腺显著增加了肿瘤发生率(20%-50%)；最常见的是雄激素不敏感综合征和5a-还原酶2型缺乏,遗传方式分别为X连锁隐性遗传和常染色体隐性遗传。性发育异常不同程度地影响患者的生殖功能,更重要的是可能诱发与性发育、性心理、性行为等相关的问题,造成心理、行为偏差,处理不当可能成为社会问题。所以,这些患者亟待诊断和处理。分子遗传学诊断不仅是明确46,XY DSD诊断的金标准,更重要的是指导治疗和可以通过产前诊断达到防止携带者生育患儿之优生目的。目的：本研究旨在对DSD这一系列疑难病症之一即46,XY DSD建立可靠的分类和基因诊断流程。并针对下述三类46,XY DSD:46,XY女性、雄激素不敏感综合征和5α-还原酶2型缺乏的临床特征和致病基因各自不同的特点,主要使用分子生物学技术,建立准确、快速的基因诊断体系和流程,阐述表型与基因型之间的关联性,为这些46,XY DSD患者提供基因诊断和产前诊断依据,以预防恶性肿瘤的发生和减少患儿的出生。方法：遗传门诊接诊46,XY DSD患者,详细了解患者各方面情况,根据体格检查、核型分析、激素检测、B超和影像检查,甚至内窥镜、活检的结果,排除性染色体DSD和46,XX DSD后,仔细分类,建立基因诊断流程。然后选取46,XY女性6个不相关家系,行SRY, DHH和NR5A1/SF1共3个基因全部外显子突变检测；选取10例完全性雄激素不敏感综合征患者(来自5个遗传不相关家系)及其家系成员和66例散发46,XY DSD(可能为雄激素不敏感综合征或其他类型DSD),行AR基因全部外显子突变检测,包含AR基因2个三核苷酸串联重复数检测；选取46,XY DSD中临床诊断尿道下裂和病历记录中不能排除尿道下裂患者共19人,行5α-还原酶2型缺乏致病基因SRD5A2全部外显子突变检测。对发现的新突变在100个遗传不相关正常人中进行突变筛查。结果：(1)46,XY女性：在病人1中检测到SRY基因点突变c.254T>C。病人2中检测到SRY因点突变c.391C>T。病人3中检测到NR5A1杂合突变c.740-787del(48)。上述三个突变均为新发。6个病人均没有发现DHH杂合或纯合突变。(2)完全性雄激素不敏感综合征：家系1：患者1A、1B检测到c.2547insA。家系4：患者4A、4B及4C检测到点突变c.2522G>A。家系5：患者5A和5B检测到点突变c.2248A>G。上述三个家系的突变均为已知致病突变。家系3：患者3A检测到c.2609T>C,为新发突变。家系4和家系5中检测到共4个女性成员为致病基因携带者。66个46,XY DSD散发患者：患者29检测到点突变c.1847G>A,患者38显示(CAG)39,为脊髓延髓肌肉萎缩症,均为已知致病突变；患者1检测到点突变c.2465T>A,患者37检测到点突变c.623G>A,此两个突变均为新发。患者10检测到一个同义突变c.2673C>T。AR基因多态：检测到多聚谷氨酰胺(CAG)n重复多态共75人(除去患者38为致病重复),存在9种等位基因,n=16-30,以n=22最多,占57.33%(43/75)；多聚甘氨酸片段(GGC)n,检测共76人,74人为n=17,仅2人n=16；没有检测到AR基因另一个多态c.639G>A。(3)46,XY DSD有尿道下裂或可疑尿道下裂患者19人：患者11检测到5α-还原酶2型缺乏致病基因SRD5A2点突变c.578A>G,患者17检测到SRD5A2点突变c.680G>A,均为已知致病突变。结论：(1)建立了检测46,XY DSD的基因诊断标准化流程。(2)对三类重要的46,XY DSD:46,XY女性、雄激素不敏感综合征和5a-还原酶2型缺乏的共5个相关基因进行了基因诊断和AR基因家系成员女性携带者身份确认,为患者及家庭提供了基因诊断和产前诊断依据,分析和研究了各个基因型与表型之间的关联性和复杂性,并提供了AR多态的不同信息,可能为不同种族人群和AR基因变异与疾病的关系的进一步研究提供依据。(3)丰富了46,XY DSD基因突变数据,检测到6个先症者中3个基因的共6种新发突变。