杏转化抗寒基因的初步研究

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杏是我国栽培面积较大的果树之一,但由于早春低温的急剧变动常使杏的花芽、花,甚至幼果受冻害,产量和经济效益受到极大的损失,因此杏常有“十年九不收”之说。利用花粉管通道法和离子注入法转化外源基因,操作简单、方便,不需要复杂的仪器和组织培养,迄今已在棉花、水稻、大豆、小麦、黄瓜、番茄和茄子等作物上取得一定成绩,为植物基因工程育种开辟了一条新的道路。本研究分别以杏优良品种金太阳、美特杏杂交授粉后代为供体,采用花粉管导入法和离子注入法将葡聚糖苷酶基因(BG2)、松树DNA片段、云杉DNA片段和比目鱼基因(afp)导入受体,取得以下结果。1.金太阳杏♀×美特杏♂杂交和美特杏♀×金太阳杏♂导入DNA后,杏果实的发育基本不受影响。2.切除花柱对座果率的影响较大;果实含糖量普遍较对照高。3.不同基因型对嫁接成活率、茎节长度和枝叶生长量影响最大,以金太阳和美特杏最适合采用离子注入法转化外源基因。4.金太阳杏和凯特杏叶片普遍较对照增厚,美特杏叶片较对照变薄。低浓度氮离子处理后,叶色正常;中等浓度处理后叶色变浅,稍发白;高浓度处理的叶色发暗。高浓度氮离子处理的叶片变异比较大,叶片基部严重缺刻呈小叶状,叶尖锐尖,状似利剑,中裂,叶片双脉,叶脉两侧严重不对称。5.注入不同的基因或DNA片段对气孔保卫细胞的大小和叶片的大小影响显著不同。6.春梢茎段最佳的升汞灭菌时间为9分钟,硬枝水培芽最适宜的升汞灭菌时间为6分钟。7.改良的WPM培养基最适合杏的分化和增值。附加BA 0.6—1.0mg/L最利于杏的增值,BA浓度高于1.0mg/L增值效果下降。
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