目的观察开心胶囊对心梗后14周大鼠心脏形态、舒张收缩功能变化的影响，探讨蛋白激酶C及ERK1／2活性作为肾素-血管紧张素系统下游信号因子在心室重构过程中的作用及开心胶囊的影响，进一步阐明开心胶囊抗大鼠心梗后心室重构的信号转导机制。方法1．大鼠心肌梗塞模型的制作及分组选用雄性Wistar大鼠，结扎左冠状动脉主干造成心肌梗塞模型36只。随机抽签法均分为3组：开心胶囊组、卡托普利组、模型组；假手术组大鼠12只，除不结扎冠状动脉外，其余操作与AMI模型组动物相同。开心胶囊组：灌胃10g／kg·d开心胶囊水煎液；卡托普利组：灌胃10ml／kg卡托普利1g／L混悬液；假手术组和模型组：正常饮水。连续给药14周。2．多普勒超声心动图评价心肌梗塞大鼠心功能采用多普勒超声心动图评价各组大鼠心功能。探头频率为12 MHz，采用标准的左室长轴切面、心尖四腔心切面、五腔心切面，同时记录心电图，以R波顶峰为舒张末期，以T波末为收缩末期，仔细观察心脏的形态、室壁运动幅度及收缩期增厚率，用Simpsons法测定射血分数(EF)值。形态学指标包括：左室舒张末期内径(LVDd)及收缩末期内径(LVDs)，左室舒张末期左室后壁厚度(LVPWd)，左室收缩末期左室后壁厚度(LVPWs)。收缩功能指标包括：射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)。比较各组大鼠心脏形态及心室功能变化。3．心脏质量／体质量比测量多普勒超声心动图检查完毕后处死大鼠，处死前测量体重后开胸取出心脏，在冰生理盐水中洗去血液，用滤纸吸去水分后电子天平测量心脏总重量并计算心脏质量／体质量比。比较各组大鼠心脏肥大程度。保存部分非梗塞心肌组织于超低温冰箱，留后期实验用。4．大鼠心肌结缔组织染色采用Mallory三色染色法进行心肌结缔组织染色，心肌组织染成黄色，间质胶原纤维染成蓝绿色。光镜下观察各组大鼠心肌细胞基本结构形态及间质结缔组织增生情况。5．开心胶囊对大鼠心梗后心肌细胞胞浆PKC的影响利用非放射性蛋白激酶C检测试剂盒检测大鼠心肌细胞胞浆蛋白激酶C含量。比较各组大鼠非梗塞区心肌细胞胞浆PKC含量。6．开心胶囊对大鼠心梗后心肌细胞ERK1／2活性的影响Western Blot法检测心肌梗塞大鼠心肌细胞磷酸化ERK1／2含量，比较各组大鼠心肌细胞磷酸化ERK1／2含量。7．数据分析与统计方法所有数据用均数±标准差(Mean±SD)表示。应用SPSS13.0软件进行分析，两组间计量资料以及多组间计量资料比较用单因素方差分析(ANOVA)检验，组间多重比较采用SNK法。P＜0.05为差异有显著性意义，P＜0.01为差异有非常显著性意义。结果1．实验动物脱失情况实验过程中模型组大鼠死亡2只，余10只；假手术组大鼠死亡2只，余10只；开心胶囊组大鼠及卡托普利组大鼠各死亡1只，各余11只。共脱失6只，进入结果分析42只。2．开心胶囊对心肌梗塞大鼠心脏形态及心功能的影响模型组大鼠射血分数、短轴缩短率低于其他3组(P＜0.01)；模型组大鼠左室收缩末期左室后壁厚度大于其他3组(P＜0.01)；开心胶囊组与卡托普利组对比，射血分数、短轴缩短率以及左室舒张末期左室后壁厚度差异无显著性意义；假手术组的射血分数、短轴缩短率大于开心胶囊组(P＜0.01)。3．开心胶囊对心肌梗塞大鼠心脏质量／体质量比的影响模型组大鼠心脏质量／体质量比大于其他3组(P＜0.01)，而开心胶囊组与卡托普利组间的心脏质量／体质量比差异无显著性意义(P＞0.05)。4．开心胶囊对心肌梗塞大鼠心脏纤维化的影响大鼠心肌结缔组织染色结果显示开心胶囊组及卡托普利组心肌间质纤维化程度轻，心肌细胞可保持原有正常结构，但与假手术组大鼠比较仍有轻微的结缔组织增生；模型组心肌肌原纤维间隙明显增宽，心肌细胞肥大，心肌细胞间纤维化程度严重。假手术组大鼠心肌组织未见胶原纤维增生，心肌细胞排列整齐，明暗带清晰，形态结构正常。5．开心胶囊对心肌梗塞大鼠非梗塞区心肌细胞胞浆PKC含量的影响结果显示，模型组大鼠非梗塞区心肌细胞胞浆PKC灰度值小于其他3组(P＜0.01)，开心胶囊组与卡托普利组间心肌细胞胞浆PKC灰度值差异无显著性意义(P＞0.05)。说明模型组大鼠非梗塞区心肌细胞胞浆PKC含量小于其他3组，差异有显著性意义；开心胶囊组与卡托普利组心肌细胞胞浆PKC含量差异无显著性意义。6．各组大鼠非梗塞区心肌细胞磷酸化ERK1／2含量比较模型组大鼠非梗塞区心肌细胞磷酸化ERK1／2与GAPDH灰度值之比大于其他3组(P＜0.01)，开心胶囊组与卡托普利组间心肌细胞磷酸化ERK1／2与GAPDH灰度值之比差异无显著性意义(P＞0.05)。半定量结果反映了模型组大鼠非梗塞区心肌细胞磷酸化ERK1／2含量大于其他3组，差异有显著性意义；开心胶囊组与卡托普利组非梗塞区心肌细胞磷酸化ERK1／2含量差异无显著性意义。结论1．急性心肌梗塞大鼠模型，经14周常规饲养，可出现心肌肥厚、心功能下降、心肌组织纤维化等表现，可以作为心室重构研究的模型。2．开心胶囊可改善大鼠心功能，可减轻心肌纤维化，保持心肌细胞正常形态结构，抑制心肌肥厚，作用结果与卡托普利相当。3．开心胶囊抗大鼠心梗后心室重构作用与调节心肌细胞胞浆内的PKC活性有关，并可影响心肌细胞内MAPK通路重要蛋白激酶ERK1／2活性，其作用与卡托普利相当。这可能是开心胶囊抗心梗后心室重构的信号转导机制之一。