亚低温联合丙泊酚对大鼠肝缺血再灌注损伤Bcl-2与Bax表达的影响

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目的观察比较亚低温、丙泊酚、亚低温联合丙泊酚分别对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时Bcl-2与Bax蛋白表达含量的变化;初步探讨其可能存在的作用机制。方法成年健康SD大鼠60只,雌雄不拘,体重200-250g,随机分为5组:假手术组(sham组,n=12),缺血再灌注组(IR组,n=12),亚低温组(H组,n=12),丙泊酚组(P组,n=12),亚低温联合丙泊酚组(HP组,n=12)。制作70%肝脏缺血再灌注模型,实验结束后即刻取肝左叶做标本。光镜观察肝组织形态学的改变。用免疫组化法检测Bcl-2与Bax蛋白表达的改变,并利用图像分析系统进行半定量分析。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记(TUNEL)法检测肝组织的细胞凋亡情况,并计算凋亡指数(AI)。结果1.光镜观察结果:与sham组比较,IR组肝细胞明显肿胀,有的呈空泡状变性,肝血窦明显受压,肝组织结构紊乱。与IR组比较,H组、P组及HP组肝组织结构损伤明显减轻。2.各组Bcl-2、Bax蛋白表达检测结果:与sham组比较,各组肝组织Bcl-2、Bax蛋白表达含量均增加,差别均有统计学意义(P<0.01);与IR组比较,H组、P组、HP组Bcl-2蛋白表达含量增加,Bax蛋白表达含量减少,差别均有统计学意义(P<O.01);与H组、P组比较,HP组Bcl-2蛋白表达含量增加,Bax蛋白表达含量减少,差别有统计学意义(P<0.01);H组与P组比较,Bcl-2、Bax蛋白表达含量差别无统计学意义(P>0.05)。3.各组细胞凋亡指数(AI)检测结果:与sham组比较,各组肝组织AI值均增加,差别均有统计学意义(P<0.01);与IR组比较,H组、P组、HP组AI值均减少,差别均有统计学意义(P<0.01);与H组、P组比较,HP组AI值减少,差别有统计学意义(P<0.01);H组与P组比较,AI值差别无统计学意义(P>0.05)。结论1.亚低温与丙泊酚二者都能够通过上调Bcl-2蛋白表达含量和下调Bax蛋白表达含量,使肝细胞凋亡减轻,从而对大鼠缺血再灌注损伤的肝脏起到明显保护作用。2.亚低温联合丙泊酚对大鼠缺血再灌注损伤肝脏的保护作用优于二者分别作用时的保护作用。
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