引进芬兰优质种蓝狐,通过使用人工授精技术扩繁及改良,使我国蓝狐养殖业近20多年来得到了快速发展。目前,蓝狐使用鲜精输精受孕率超过80%。但由于缺乏相应的育种手段,种质呈现逐年退化趋势,不得不重复引进。精液冷冻技术理论上可以无限期的保存蓝狐精液,实现精液远距离的交流,同时对于生产蓝霜狐(银狐♂×蓝狐♀)具有巨大的应用意义。然而,目前蓝狐精液冷冻技术在世界范围内尚未成熟,因精子冻融后存活率低下,显著影响母狐的受孕率。为进一步了解超低温冷冻对蓝狐精子运动性及内部结构造成的损伤,从而选择更优质的冷冻保护剂和完整的蓝狐精液冷冻工艺系统,进行了本试验研究。试验(一):试验共分4组,法国卡苏精液冷冻稀释液(Ⅰ)、东林Ⅱ号—卵黄冷冻稀释液(Ⅱ)、Tris—卵黄冷冻稀释液(Ⅲ)及对照组常温稀释液东林Ⅱ号(Ⅳ)。冻融后检测三种冷冻稀释液冷冻效果,分别使用伊红—苯胺黑染色法、低渗肿胀法、考马斯亮蓝染色法检测精子存活率、精子质膜完整率、精子顶体完整率,同时检测37℃精子的存活时间及生存指数并通过与鲜精对比综合选定最佳的冷冻稀释液;试验(二):将原精分为A、B两组,A组常温稀释,B组选用Ⅲ稀释液分3批分别为B1、B2、B3组对蓝狐精液冷冻,通过IVOS精子运动检测系统检测4组精子运动情况,并通过透射电子显微镜观察A、B,两组精子内部结构;试验(三):选取解冻后精子活率高于0.3的精液对15只母蓝狐进行输精试验。结果显示:超低温冷冻对蓝狐精子的损伤很大,与Ⅳ组相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组精子冻融后存活率平均下降48.3%,精子质膜完整率平均下降48%,顶体完整率平均下降37.4%;37℃时的冻融后精子平均存活时间(13h)及平均生存指数(2.25)远低于Ⅳ组的存活时间(37h)和生存指数(7.85),精子在解冻后由于复苏温度高激发精子运动,但精子存活时间较短;在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组中,Ⅲ组精子存活率、质膜完整率、顶体完整率均高于Ⅰ、Ⅱ组;三种蓝狐精液冷冻稀释液对蓝狐精子保护的效果依次为:Ⅲ>Ⅰ>Ⅱ;A、B组精子运动性差异极显著(P<0.01),B组快速运动的精子平均占25.1%,中速运动的精子平均占39.8%,慢速运动的精子占平均4.2%,不运动的精子平均占30.9%;B1、B2、B3组精子存活率及快速运动的精子差异显著(P<0.05)。冷冻工艺存在人工操作因素影响,建议使用自动冷冻机冷冻;使用透射电子显微镜观察,B:组损伤最严重的是精子头部膜结构,顶体完整率仅占25%,冷冻对精子赤道段、颈部、尾部、线粒体及微管损伤较小;虽然蓝狐精液冻融后精子活力达0.3以上,符合常规冻精输精标准,但由于蓝狐精子冻融后在37℃条件下精子存活时间及生存指数过低,导致试验15只蓝狐只有1只产崽,冻精输精受孕率只有6.7%。