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十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)是一种植物病原细菌,能使所有十字花科植物产生黑腐病,其侵染范围遍布全球。Ⅲ型分泌效应物是重要的病原菌致病因子。在Xcc8004中已鉴定出17个Ⅲ型分泌效应物基因,即XC0052、XC0241、XC0541、XC0542、XC1210、XC1553、XC2004、XC2081、XC2210、XC2602、XC2994、XC2995、XC3160、XC3176、XC3177、XC3802和XC4273。本研究通过构建效应物基因的缺失突变体来研究各效应物基因对病原菌致病性的影响。构建了 17个效应物基因的单基因缺失突变体和28个效应物基因的多基因缺失突变体,多基因缺失突变体中的十六基因缺失突变体(A16)缺失了除XC2210外的16个效应物基因,十七基因缺失突变体(A17)缺失了所有17个效应物基因。致病性试验结果表明 XC0052、XC0241、XC0541、XC0542、XC1210、XC2994、XC2995、XC3160、XC3177、XC4273 对病原菌的致病性有影响,这10个基因的单基因缺失突变体的致病性降低显著。XC1553、XC2004、XC2081、XC2210、XC2602、XC3176 和 XC3802各自的单基因缺失突变体的致病性与野生型Xcc 8004相比无明显变化。△16和△17的致病性降低非常显著,致病力分级为1级。在△17上进行了单个效应物基因的反式功能互补,构建了 16个互补菌株,致病性试验结果表明仅补回单个的效应物基因不会显著恢复A17的致病性。通过Xcc 8004剪叶接种鉴定出一种对Xcc 8004有抗性的植株品种萝卜3号。细菌在寄主中的生长与繁殖试验结果表明萝卜3号能在一定程度上抑制病原菌在其体内的生长繁殖。通过致病性试验及过敏反应试验证明在17个效应物基因之外一定有还没有发现的效应物基因是可以作为抗性寄主萝卜3号可识别的无毒基因的。通过农杆菌介导证实 XC0241、XC0541、XC0542、XC2081、XC2602、XC2994、XC2995、XC3177、XC3802、XC4273、XC1210、XC1553、XC2210和XC3160均不是萝卜3号叶肉内的抗性基因可识别的无毒基因。用Xcc 8004、33913和20个中国菌株和对萝卜3号进行剪叶接种,发现萝卜3号能被长春xc-2、甘油xc-1、顺义xc-6、008、广西桂林xc-3、广西南宁xc-1、广西南宁xc-2等7个菌株侵染,而萝卜3号对Xcc 8004、黑河xc-1、大连xc-3、大兴xc-1、天津xc-1、山西萝卜xc-1、西安香玉xc-1、西安杜曲xc-1、河南南阳xc-1、005、广西桂林xc-1、广西桂林xc-2、广西南宁xc-3、广西南宁xc-4和33913具有抗性。