阿斯匹林抑制HL-60细胞增殖及诱导调亡的实验研究

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目的 以人急性髓细胞性白血病细胞系HL-60为模型,研究非甾体类抗炎药阿斯匹林(ASA)对HL-60细胞生长的影响。 方法 利用台盘兰拒染法计数活细胞数,MTT法测定ASA对HL-60细胞的抑制率,并分析剂量反应曲线;通过光镜、流式细胞仪(FCM)、DNA凝胶电泳,观察ASA诱导HL-60细胞凋亡,了解其对细胞周期的影响;用免疫细胞化学及RT-PCR方法检测药物作用前后c-myc蛋白和mRNA的表达情况。 结果 (1)ASA在浓度为2.5~10mM/L作用72h后,对HL-60细胞增殖抑制随浓度增加而增加,其IC50值为8.97mM/L;并且2.5mM/L ASA与100μg/L Ara-c有协同作用。(2)ASA浓度为2.5~10mM/L作用72h后,形态学上可见典型凋亡细胞,DNA电泳结果有梯度条带(DNAladder)出现,FCM分析显示有亚G1峰出现,HL-60细胞凋亡率随浓度增加而升高。(3)ASA处理后HL-60细胞G0/G1期细胞减少,S期细胞增多。(4)2.5mM/L ASA作用12h后,c-myc蛋白表达下降其基因表达亦下调。 结论 结果提示一定浓度的ASA在体外能抑制HL-60细胞增殖并重庆医科大学硕士学位论文且能够诱导其凋亡,抑制率及凋亡率与ASA剂量相关。ASA诱导凋亡可能与其干扰细胞周期,下调c-myc基因表达而使蛋白表达下降有关。
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