本研究分为三部分：对7个HB家系的先证者进行了相关基因缺陷的检测，并对国际上新发现的2种FⅨ基因突变进行了体外表达研究，以探讨其分子发病机制；同时还对1个遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系和两个特殊的血友病A家系分别进行了基因诊断。 　　一、2个新突变导致血友病B的发病机制研究 　　本研究对7例HB家系的先证者进行了基因诊断，并对两个国际上首次报道的突变进行了分子发病机制的研究。检测凝血指标以明确诊断；用DNA直接测序法对先证者FⅨ基因的全部外显子及其侧翼序列以及5’和3’非翻译区进行分析，发现突变基因。对这两种突变，通过克隆野生型FⅨcDNA和构建突变体进行了体外表达研究。脂质体法分别转染HEK293或CHO细胞，体外表达后采用ELISA、Western印迹、免疫荧光染色和细胞分泌蛋白活性测定等试验进行检测。 　　二、遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症的基因诊断 　　本文对该家系成员FⅫ基因所有外显子及其侧翼序列以及启动子区的测序分析表明：先证者的1号外显子部位存在46C/T 　　多态性，13号外显子存在6908G/A杂合突变。 　　三、两例特殊的血友病A家系的基因诊断 　　直接基因测序并结合单倍体间接诊断的技术路线完善了血友病的遗传咨询检测体系，为缺乏先证者和(或)常用基因检测方法不能获得诊断信息的家系，提供了一种新的诊断方法。