蛋白激酶CK2抑制剂CX4945对子宫内膜癌增殖凋亡及血管生成的影响

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目的:探索蛋白激酶CK2抑制剂CX4945对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、凋亡、血管生成的影响及其可能的机制。方法:1.用CCK8方法检测不同浓度的CX4945(0、2、4、8、16、32、64、100)umol/L作用24h对于子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖抑制率,利用Graph Pad Prism5软件计算CX4945对子宫内膜癌细胞增殖抑制率的IC50值。2.利用不同浓度的CX4945(0、5、10、20、30)umol/L及不同时间段(4 h、24h、48h)分别作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞,用免疫印迹方法检测p-AKT、VEGFA、Caspase3蛋白表达的变化。3.利用体外划痕实验检测CX4945(30umol/L)作用前后细胞的迁移能力的变化。4.运用Hoechst33258染色的方法观察CX4945(0、30)umol/L处理子宫内膜癌Ishikawa细胞24h后观察细胞的凋亡情况。结果:1.CX4945对子宫内膜癌Ishikawa细胞的抑制率IC50为54.13umol/L。2.不同浓度CX4945(0、5、10、20、30)umol/L作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞不同时间段(4h、24h)后p-AKT Th308、Ser473的蛋白表达量随着药物浓度的增加而减少,蛋白表达随作用时间的延长而减少(p<0.05)。3.不同浓度CX4945(0、5、10、20、30)umol/L作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞48h后,VEGFA蛋白表达量随着浓度的增加而减少(p<0.05)。4.不同浓度CX4945(0、5、10、30)umol/L作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞24h后凋亡蛋白Caspase3蛋白表达量随着浓度的增高而增加(p<0.05)。随着凋亡蛋白Caspase3蛋白表达量增加,细胞的凋亡较对照组明显增加(p<0.05)。5.CX4945作用的子宫内膜癌Ishikawa细胞迁移明显少于对照组。结论:1.本实验研究蛋白激酶CK2抑制剂CX4945在子宫内膜癌细胞中的相关作用机制,发现其可抑制细胞增殖、促进凋亡。2.蛋白激酶CK2抑制剂可促进凋亡执行蛋白Caspase3的表达,下调蛋白p-AKT,提示CX4945可能PI3K/AKT通路抑制子宫内膜癌细胞的增殖,促进凋亡。3.蛋白激酶CK2抑制剂作用后的子宫内膜癌细胞中VEGFA蛋白表达下降,提示其可能抑制子宫内膜癌血管生成。
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