L-酪氨酸代谢平台构建及其在丹参素合成中的应用

被引量 : 0次 | 上传用户:lilyzhanglove
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
L-酪氨酸是一种重要的芳香环平台化合物,广泛应用于食品、医药以及化工等领域。由于天然微生物合成积累L-酪氨酸的能力很低,研究从生物质碳源如葡萄糖到L-酪氨酸途径的全局代谢优化,构建高产L-酪氨酸代谢平台,并应用于衍生物的合成具有重要意义。本文基于模块化代谢工程的理念,设计并合成了BldgBrick模块组装系统,构建了包含L-酪氨酸代谢途径、糖转运系统、TCA循环以及抗逆性基因等12个基因在的四个模块。通过对模块之间适配性的筛选发现,由LacUV5启动子控制aroGfbr-tyrAfbr-aroE组成的模块1和由trc启动子控制的ppsA-tktA-glk组成的模块2组合在一起的pYBT5质粒适配性最佳。利用λ Red同源重组技术,通过连续基因敲除,构建了ptsG、tyrR、pykA、pykF和pheA的5个不同缺失的BAK底盘菌株。模块与底盘细胞的适配性表明,pYBT5与BKT5菌株为最优L-酪氨酸工程菌株,发酵72h,L-酪氨酸产量为702mg/L,产率达到理论得率19.5%。利用人工设计anti-csrA sRNA2沉默E. coli csrA基因,提高L-酪氨酸产量约1.2倍。以L-酪氨酸为平台化合物,重新设计了由4-羟基苯乙酸间位羟化酶基因(hapBC)和突变的D-乳酸脱氢酶基因(d-ldhY52A)组成的人工丹参素合成模块,构建了丹参素工程菌株BKD5。发酵72h的丹参素产量达7.14g/L,产率为0.47mol/mol葡萄糖。本文采用合成生物学,通过代谢途径模块化和底盘构建双向策略,实现了L-酪氨酸全局代谢途径优化,提高了L-酪氨酸的产量。而新途径的创建,实现了L-酪氨酸衍生物丹参素的高效合成。所构建的L-酪氨酸代谢平台具有稳定性与高效性,可应用于合成其他L-酪氨酸衍生物。
其他文献
以活品虾夷扇贝(Pationopecten yessoensis)供应链为研究对象,先后进行了活品供应链案例实地调查以及流通链模拟研究,重点跟踪分析了沿活品链的扇贝肠道菌群结构变化规律;同时,还对
采用1996—2010年中国30个省级面板数据,考察人力资本结构与经济增长关系,并就教育人力资本对经济增长的影响进行门槛效应检验。研究结果显示,在总体上,人力资本构成中的教育
<正> 普强苏州制药有限公司是辉瑞全球制药集团的一员,始建于1993年,现为生产包括片剂、胶囊剂、粉针剂、小容量注射剂在内的大型药品制剂企业,其中小容量注射剂生产线BFS(bl
<正>"生物医学研究的最新技术进展使鉴定多种分子生物标记物变得更加容易,有助于促进癌症筛查和检测……通过允许医生为患者制定个体化治疗来提高癌症治疗的有效性和安全性。
我国城镇居民养老保险的资金来源由个人缴费、政府补贴、其他经济组织和社会组织资助构成。通过对2009年全国各省市人口、财政等方面的数据分析,并运用各省(区、市)最低工资
[目的]研究用真菌诱导黄粉虫幼虫表达抗菌物质及其对真菌的影响。[方法]用黄粉虫幼虫从土壤中诱捕真菌,培养出2种病原真菌作为诱导源分别对黄粉虫幼虫做诱导试验,每种试验分
随着电子化交易平台在全世界股票市场的逐渐成熟,量化交易成为各证券市场的新宠。在国外,量化交易被广泛应用于投资机构的实际操作中,近年来迅速兴起但饱受争议的高频交易就属于
随着我国经济的快速发展,国民经济对于矿产资源的需求量逐年提高.国家也高度重视,鼓励企业到境外投资矿产行业。因此对于境外投资风险的控制成为企业的研究难题。本篇文章在对
介绍了颗粒包装机和硬胶囊填充机的工作原理,阐述了不同的灌装方式并分析了其优缺点,为提升制药灌装设备的设计思路提供了借鉴。
融资担保公司在我国属于一个新兴的行业。进入21世纪以来,随着我国经济,特别是民营高科技企业的发展,我国的融资担保行业也得到了蓬勃发展。由于融资担保业务的高风险性,整个担保