【摘 要】
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该研究用该研究主要通过PCR,克隆SEB基因到表达载体pTIG-Trx中,引入大肠杆菌BL21中,诱导表达,利用SDS-PAGE,Western检测和鉴定.表达出的SEB,经纯化后的SEB免疫兔子,取脾,提取
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该研究用该研究主要通过PCR,克隆SEB基因到表达载体pTIG-Trx中,引入大肠杆菌BL21中,诱导表达,利用SDS-PAGE,Western检测和鉴定.表达出的SEB,经纯化后的SEB免疫兔子,取脾,提取总RNA,做RT-PCR,以cDAN为摸板,扩增出VH,VL片段,用柔性linker连接后,连接到噬菌粒pCANTAB5E中,建立抗体库,该研究通过改构的噬菌粒成功的构建了单链抗体库,为筛库和SEB中毒检测,治疗等奠定了基础.结果获得了良好的可溶性表达,纯化产量为150mg/L.纯化产物免疫兔子后,经RT-PCR和三轮PCR成功的构建了单链抗体库,库容达1011,可用于下一步工作.
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