目的:通过培养原代翼状胬肉成纤维细胞(HPFs),观察绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)对HPFs增殖及凋亡影响,分析不同剂量EGCG及不同作用时间对HPFs增殖的影响,探讨EGCG抑制翼状胬肉的生物学作用,为翼状胬肉辅助治疗提供新的方案与策略。方法:1.通过组织块贴壁培养法进行原代翼状胬肉成纤维细胞(HPFs)培养;2.利用细胞免疫化学染色波形蛋白(vimentin)、广谱角蛋白(CK)鉴定纯化的HPFs细胞;3.利用CCK-8法检测不同浓度EGCG及相同浓度EGCG不同作用时间对翼状胬肉成纤维细胞增殖的抑制作用;4.通过流式细胞仪(FCM)检测不同浓度EGCG对翼状胬肉成纤维细胞凋亡的影响;5.利用SPSS22.0进行统计学分析:所得数据以X±S表示,各组数据采用重复测量的方差分析,各实验组与对照组的比较采用t检验,p<0.05为差异有统计学意义的标准。结果:1.HPFs细胞原代培养成功,于倒置显微镜下观察:培养5天左右细胞从组织块周边爬出,细胞呈长梭形,散在分布在组织块周围。2.翼状胬肉成纤维细胞(细胞免疫化学染色法)鉴定:细胞传代培养至3～5代,进行鉴定,光镜下观察染色细胞,胞质内可见大量棕黄色颗粒(Vimentin染色阳性),CK染色阴性。3.HPFs在不同浓度EGCG作用下形态学发生明显变化;EGCG对HPFs细胞增殖有抑制作用,且呈剂量及时间依赖性;当EGCG浓度达500μM作用72小时,对HPFs细胞增殖抑制率可达93.39%。4.流式细胞术检测发现200μM EGCG作用HPFs 48小时后,可导致约20%HPFs细胞凋亡,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.EGCG可抑制HPFs增殖,具有时间、浓度依赖性。2.EGCG200μM作用HPFs 48小时,可诱导其发生凋亡。3.EGCG抑制HPFs增殖及诱导其凋亡,可作为防治翼状胬肉复发的辅助治疗药物,但其临床的辅助治疗作用有待进一步深入研究。