采用组织学和电镜的方法详细地研究了红螯螯虾雌雄生殖系统发育以及精子、卵子发生的详细过程,并在形态学研究的基础上采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳等生化方法初步分析了精巢发育过程中蛋白种类的变化以及雄性生殖系统各部分蛋白酶的基本性质。 一、红螯螯虾雌性生殖系统发育的研究 红螯螯虾的雌性生殖系统由卵巢、输卵管和雌性生殖孔组成。卵巢由附属部、主体部及二者之间的连接管构成,其内部结构可分为四部分:卵巢壁、上皮层、滤泡和卵巢壁内突物。根据细胞生长、发育的形态学特征及规律,卵子发生过程可分为卵原细胞期、初级卵母细胞期和成熟期三个阶段,其中初级卵母细胞期又根据其卵黄积累状况可分为卵黄发生前期、早期、中期和后期四个阶段。根据其滤泡的颜色、大小,卵巢的发育可分为4个阶段:未发育期、发育期、排卵期和恢复期。 二、红螯螯虾雄性生殖系统发育的研究 红螯螯虾的雌性生殖系统主要由精巢、输精管和雄性生殖孔组成。精巢主要由收集管和生精小囊两部分构成。精子在生精小囊中分化、发育,同一生精小囊内精子发育同步,不同生精小囊内精子发育不同步使得精巢能够连续不断的产生精子。根据减数分裂的过程精子发生可分为:精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和精子五个阶段。精细胞经历一个复杂的变形过程形成精子,其胞核先凝聚、再解聚最后又凝聚。红螯螯虾精子的外形呈“油煎蛋”状,由一头盔状的顶体和不规则顶体部构成。主体部发出多条核起源的棘突,其内未见有微管和微丝结构。 三、红螯螯虾雄性生殖系统蛋白及蛋白酶的研究 以SDS-PAGE的方法对比分析体长分别为4cm、6cm、10cm的仔虾和体长大于13cm成虾的精巢总蛋白发现三种仔虾精巢的蛋白条带相似,而成虾精巢蛋白组成与仔虾有较大的差异。通过从6—12的PH值梯度下酶活测定分析,未成熟仔虾(头胸甲长度小于5cm)在PH6和10出现两个酶活的峰值,而成虾(头胸甲长度大于5cm)的精巢蛋白酶只在PH10出现一个较大的峰值。本次蛋白酶复性电泳可见两条清晰的蛋白酶条带A和B。蛋白酶A分子量大于B,A在PH6下活性比在PH10下活性高,而B与A相反。 另将雄性红螯螯虾成体的生殖系统分为精巢、前输精管、中输精管、后输精管内含物和管壁五个部分分别研究其蛋白酶的活性和组成。其中前输精管蛋白酶