【摘 要】
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目的肺癌的发生是一个复杂的过程,涉及环境、基因等不同的影响及遗传事件的积累和多宿主肿瘤的相互作用,而最终导致细胞不受控制的生长和肿瘤的克隆发展。本研究目的旨在探讨
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目的肺癌的发生是一个复杂的过程,涉及环境、基因等不同的影响及遗传事件的积累和多宿主肿瘤的相互作用,而最终导致细胞不受控制的生长和肿瘤的克隆发展。本研究目的旨在探讨miR-21对肺癌A549细胞中Smad7表达的调控机制和其对肺癌A549细胞增殖的相关影响。分析miR-21和Smad7在非小细胞肺癌发生发展中的作用机制,了解肺癌的发病机制,为肺癌的治疗提供用药依据。方法常规培养肺癌细胞系A549,对数生长期A549细胞进行转染实验。将miR-21抑制物、模拟物和阴性对照与脂质体LipofectamineTM 2000 Reagent混匀,室温静置20 min后,加入相应各孔细胞中,37℃、5%C02保温箱孵育4-6 h,更换含血清RPMI1640,24 h和48 h后提取转染后细胞的总RNA和总蛋白。分组转染miR-21抑制物组、转染miR-21模拟物和阴性对照组MTT,比色法检测细胞增殖。细胞蛋白质及细胞RNA提取后,采用Western blot、qRT-PCR法检测Smad7基因及蛋白的表达水平,MTT法检测A549细胞增殖情况。结果转染miR-21模拟物后Smad7的mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05),而转染miR-21抑制物后Smad7的mRNA和蛋白表达量升高(P<0.05)；MTT结果显示转染miR-21模拟物后细胞的增殖能力明显增强(P<0.05),而转染miR-21抑制物后细胞增殖能力明显减弱(P<0.05)。结论通过下调miR-21可提高Smad7的mRNA和蛋白表达,进而抑制A549细胞的增殖。
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