论文部分内容阅读
甜橙(Citrus sinensis Osbeck)是柑橘重要的栽培类型之一,既适于鲜食,又可用于生产橙汁。甜橙加工后,大量皮渣等副产物造成资源的严重浪费。国内外研究表明,甜橙果皮中富含具有抗氧化、抗炎、抗衰老等功能的黄酮类物质,对慢性疾病的防治有一定功效。本文以重庆地区主栽的13种甜橙为试验材料,对不同品种甜橙果皮中类黄酮物质进行分析,并采用DPPH、ABTS、FRAP三种方法评价其抗氧化活性。在此基础上,采用高效液相法(HPLC)进行精确定量,研究浸提参数对甜橙果皮中黄烷酮与多甲氧基黄酮的提取效果的影响,针对不同极性的黄酮类物质,确定最佳提取条件。同时利用不同极性的大孔树脂对甜橙果皮提取物总黄酮进行吸附、解吸,筛选出适宜纯化的树脂类型,并对其动态吸附条件进行优化,确定最优工艺参数。研究结果如下:(1)选择了13个具有代表型的甜橙品种,采用NaNO2-Al(NO3)3、Folin-Ciocalteus比色法进行总黄酮和总酚含量的研究。研究结果表明:13种重庆主栽甜橙中,果皮的总黄酮平均含量为9.28 mg RE/g DW(RE,为芦丁当量;DW,干重,下同)低于总酚平均含量14.86 mg GAE/g DW(GAE,没食子酸当量)。其中,班菲尔脐橙的总黄酮含量最高,总酚含量最高的是鲍威尔脐橙。(2)采用高效液相色谱测定了甜橙果皮类黄酮物质,研究发现:甜橙果皮中黄酮类物质主要为黄烷酮和多甲氧基黄酮,其中橙皮苷是含量最高的黄烷酮,约占80%以上;班菲尔脐橙的橙皮苷含量最高,达到28.13 mg/g,铜水72-1的橙皮苷含量最低,仅为11.72 mg/g;多甲氧基黄酮中含量最高的是川陈皮素,其中S26锦橙、古巴柳叶橙和伦晚脐橙果皮中多甲氧基黄酮含量较高,脐血橙的多甲氧基黄酮含量最低,仅为0.57 mg/g。(3)使用DPPH、FRAP、ABTS三种体外抗氧化方法测定不同品种甜橙的果皮的抗氧化活性。采用综合抗氧化指数(APC)对不同品种甜橙果皮的抗氧化活性进行评价,结果表明果皮综合抗氧化能力最强的品种是伦晚脐橙。(4)以甜橙果皮为材料,采用加热浸提法,考察了乙醇体积分数、时间、温度、以及料液比等提取参数对黄烷酮和多甲氧基黄酮含量的影响。结果表明:乙醇体积分数和提取温度是最重要的提取参数。在相同提取参数下,甜橙果皮中黄烷酮和多甲氧基黄酮,两者的变化趋势差异明显。利用单因素实验,确定黄烷酮的最佳提取工艺为:乙醇体积分数70%,料液比为1:20,90℃提取4 h,达到24.74±0.42 mg/g;而多甲氧基黄酮提取的最佳条件为:乙醇体积分数80%,料液比为1:10,60℃提取2 h,可达2.83±0.08 mg/g。(5)按总黄酮含量最高的工艺条件进行提取,得到粗黄酮提取物的纯度仅为3.60%。考察了AB-8、NKA-9、D101三种不同极性大孔树脂的静态吸附与解吸性能,通过对比发现,大孔树脂AB-8的吸附量最高,且解吸性能较好,满足对甜橙果皮总黄酮纯化工艺要求。通过对吸附、解吸条件的优化,确定大孔树脂AB-8纯化甜橙果皮总黄酮的最佳工艺条件为:0.75 mg/m L的pH=3上样液,上样体积为3.5倍柱体积(BV),上样流速为2 BV/h;80%乙醇为洗脱剂,2 BV/h流速洗脱,洗脱体积为5 BV,解吸率达90.73%。纯化后,甜橙果皮提取物中总黄酮含量由36.04 mg/g增加到纯化后334.54 mg/g,总黄酮含量比纯化前提高了8.3倍。HPLC结果分析表明,大孔树脂纯化前后不会造成单体黄酮组成变化,其中主要黄酮类物质是芸香柚皮苷、橙皮苷,占总量的91.14%。