肺炎克雷伯菌嗜铁素基因携带情况与其感染A549细胞时NGAL的表达研究

来源 :重庆医科大学 重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mkms2080
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
第一部分肺炎克雷伯菌嗜铁素基因携带情况分析目的:研究重庆医科大学附属儿童医院临床分离的肺炎克雷伯菌株携带嗜铁素基因的情况。方法:随机选取从我院临床住院患者中分离的肺炎克雷伯菌株34株(血液13株,痰液21株),采用PCR法检测菌株嗜铁素基因的携带情况。结果:34株菌株中,所有菌株均携带肠菌素(Ent)基因entB,9株(26.5%)携带耶尔森菌素(Ybt)基因fyuA,3株(8.8%)携带沙门菌素——糖基化肠菌素(Gly-Ent)基因iroN,1株(2.9%)携带产气菌素(Aer)基因iutA;所有菌株中,只含有Ent一种嗜铁素基因的25株(73.5%),同时含有其他非Ent嗜铁素基因的9株(26.5%),其中entB、fyuA均阳性者6株(17.6%),entB、ybtS及iroN均阳性者2株(5.9%),4种基因均阳性者1株(2.9%)。结论:我院临床分离的肺炎克雷伯菌携带的嗜铁素基因以Ent基因为主,非Ent嗜铁素基因的检出需引起注意。第二部分肺炎克雷伯菌感染A549细胞时活性氧的产生上调NGAL的表达目的:研究肺炎克雷伯菌(KP)感染A549细胞时,活性氧(ROS)的产生对A549细胞天然免疫蛋白——中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)表达的影响。方法:将A549细胞株分5组进行实验:正常对照组,H2O2组,H2O2+维生素E(VE)组,KP组,KP+VE组。采用鲁米诺化学发光法检测各组活性氧水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测A549细胞NGAL mRNA的表达;Western-blot检测A549细胞NGAL蛋白的表达。结果:KP组与阳性对照H2O2组ROS水平均较正常对照组升高,同时,两组A549细胞NGAL mRNA及蛋白质的表达也较对照组升高,而两组在加入抗氧化剂VE后,ROS水平都降低,相应的,两组A549细胞NGAL mRNA及蛋白质的表达也下降。结论:肺炎克雷伯菌感染呼吸道A549细胞时,ROS的产生上调A549细胞天然免疫蛋白NGAL的表达。
其他文献
目的:探讨JAZF1基因过表达对自发性肥胖糖尿病db/db小鼠胰岛素抵抗及糖异生的影响及作用机制。  方法:将8周龄db/db小鼠,随机分为三组:db/db生理盐水组(db/db-NS,n=6),db/db空载