【摘 要】
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J201是青岛大学附属医院提供的昆布提取物.前期实验研究表明,J201在体外能够明显抑制人胚肺成纤维细胞的增殖,将其抑制在G/G期,并且能够抑制其蛋白质的合成,从而起到抗肺纤维
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J201是青岛大学附属医院提供的昆布提取物.前期实验研究表明,J201在体外能够明显抑制人胚肺成纤维细胞的增殖,将其抑制在G<,0>/G<,1>期,并且能够抑制其蛋白质的合成,从而起到抗肺纤维化的作用.该文通过体外和体内的实验,进一步确证了J201的抗肺纤维化作用并且探讨了其作用的机理.肺纤维化是由于过多的成纤维细胞聚集和细胞外基质成分如胶原蛋白过度沉积而导致的正常肺组织结构改变和功能丧失的一类疾病.目前,体外评价药物抗肺纤维化的细胞模型还不是很成熟,因此该文分别采用了与肺纤维化密切相关的PDGF-BB、大鼠肺泡巨噬细胞(Alveolar Macrophage,AM)条件培养上清液作为诱导因子,在体外建立了评价药物抗肺纤维化的细胞模型.成纤维细胞的增殖采用了MTT法检测,胶原的含量采用了Sircol胶原检测试剂盒进行检测.为了进一步探讨机理,我们提取了J201的主要成分,并制备了J201主要成分的生物传感芯片(SPR),利用生物传感器研究了J201与PDGF-BB的相互作用.结果发现,J201的主要成分与PDGF-BB有较强的结合.推测J201的抗纤维化的作用可能与拮抗PDGF-BB有关.体内采用了气管内注射博来霉素导致的大鼠肺纤维化模型,评价了J201的抗肺纤维化作用.不同浓度J201通过灌胃每天给药,28天后经腹主动脉取血,分离血清,-20℃储存备用,检测血清中IL-4、IFN-γ的含量.取出肺脏,称重后,计算肺系数,切下右肺,匀浆测定了肺组织的丙二醛、羟脯氨酸含量,左肺投入4﹪的多聚甲醛中固定,常规切片,HE染色,观察肺组织病理形态学变化.结果显示光镜下J201能够减轻肺炎症细胞浸润及纤维化的程度,肺指数降低,治疗组较对照组肺组织上清液丙二醛、羟脯氨酸的含量均有明显的降低,并且血清IL-4的含量降低,IFN-γ升高.我们还观察了J201对肺纤维化大鼠肺泡巨噬细胞释放TNF-α的影响,结果发现其对肺纤维化大鼠肺泡巨噬细胞释放TNF-α有一定的抑制作用.综合体内和体外的实验结果,我们得出结论:J201能够通过抑制PDGF-BB诱导的成纤维细胞增殖、抗氧化和抑制Th2因子生成以及肺泡巨噬细胞释放TNF-α等多个途径对肺纤维化起到抑制作用.
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