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蛋白酶在食品、医药、洗涤、制革等行业有着广泛的应用。本论文从南昌大学食堂污水中分离筛选出一株产蛋白酶的野生菌CL-10,并进行菌种鉴定、发酵工艺优化、诱变、分离纯化、酶学性质的研究,结果如下:从南昌大学食堂污水样品中,通过菌株的富集、平板初筛和摇瓶复筛测定蛋白酶酶活,得到一株产蛋白酶酶活较高的菌株,命名为CL-10。通过形态学观察、扫描电镜、革兰氏染色、生理生化试验、分子生物学试验,并命名为解淀粉芽孢杆菌 CL-10(Bacillus amyloliquefaciens CL-10)。通过单因素试验和响应面优化培养基成分,探究出最佳发酵培养基条件为:菜籽粕含量6.1%、玉米粉含量4.4%、麸皮含量3.2%、ZnSO4·7H2O浓度为0.2%、吐温20浓度为0.7%;优化发酵条件为:培养温度37℃、初始pH 7.0、装液量50 mL、接种量4%、发酵时间54 h,相较于未优化前,在最优条件下,酶活从2715 U/mL 提高到 6648.4 U/mL。进行紫外—硫酸二乙酯复合诱变,紫外线的最佳诱变条件为功率15 W,照射距离30 cm,照射时间为150 s;硫酸二乙酯的最佳诱变条件为浓度0.5%,温度37℃,转速200 rpm,诱变时间14 min。经过紫外和硫酸二乙酯复合诱变后,最后筛得一株产蛋白酶为 7581.3 U/mL 的菌株Bacillus amyloliuefaciens CL-10-1,较出发菌提高了 14.03%,该菌株经过连续5代培养,其发酵液的蛋白酶活力较第一代菌株保留97%以上,具有良好的遗传稳定性。通过硫酸铵沉淀、透析、DEAE-Sepharose Fast Flow、Sephadex G-50 分离纯化经电泳检测为单一条带的纯酶,经过软件分析与标准蛋白相比,该蛋白酶的分子量为27.9 kDa。研究解淀粉芽孢杆菌CL-10产蛋白酶的酶学性质,蛋白酶的最适温度为45℃,在35～45 ℃稳定性较好,保温90 min仍能保留50%以上的酶活;蛋白酶白酶的最适pH为7.0,在pH 6～8时稳定性较好,保温120 min仍能保留50%以上的酶活。