淋巴血浆置换治疗对重症肌无力患者CD4~+T细胞亚群的影响

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目的:本研究通过检测淋巴血浆置换(Lymphoplasmapheresis, LPE)治疗前后重症肌无力(Myasthenia Gravis, MG)患者外周血中Th1、Th2、 Th17、Treg细胞的频率变化,比较患者临床评分的改善,探讨LPE对MG患者AChR-Ab及CD4+T细胞亚群的影响,分析它们之间变化的关系,揭示LPE治疗MG的免疫机制,为探寻MG的治疗策略提供理论依据。方法:14例入组MG患者,14例健康体检者作为对照;LPE治疗前后完善QMG标准评分,14例MG患者采集外周血,利用ELISA检测MG患者外周血清抗AChR-Ab水平,流式细胞术检测Th1、Th2、Th17、Treg细胞的频率;分析各项指标之间的相关性。所有统计资料用SPSS17.0软件包处理。结果:(1)根据QMG评分方法对MG患者LPE治疗前及治疗后第三天进行评分。LPE治疗后MG患者的临床评分较治疗前显著降低(9.70±3.62分、18.50+3.47分),差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)LPE治疗后第三天,MG患者血AChR-Ab水平显著低于治疗前(142±59pmol/1、258±74pmol/l),差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)LPE治疗前MG患者Thl细胞的频率高于正常对照组(25.64±7.23%、16.51±5.03%),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗3天后,患者Thl细胞的频率低于治疗前但高于正常对照组(20.72±4.15%、25.64±7.23%、16.51±5.03%),差异均具有统计学意义(P<0.05)。LPE治疗前MG患者Th2细胞的频率与对照组相比无显著性差异(P>0.05);治疗3天后,患者Th2细胞的频率高于治疗前,但差异无统计学意义(P>0.05)。LPE治疗前MG患者Th17细胞的频率高于正常对照组(2.05+0.51%、0.94±0.23%),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗3天后,患者Th17细胞的频率低于治疗前(1.18±0.36%、2.05±0.51%),差异具有统计学意义(P<0.05),但与正常对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。LPE治疗前MG患者Treg细胞的频率低于正常对照组(2.16+0.73%、4.26±0.82%),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗3天后,患者Treg细胞的频率高于治疗前但仍低于正常对照组(3.37±0.75%、2.16±0.73%、4.26±0.82%),差异均具有统计学意义(P<0.05)。(4)每次LPE治疗大约可置换出2-3×109个单核淋巴细胞。流式检测LPE液中的Th、Th2、Th17、Treg细胞频率,发现LPE液中Thl、Th2、Th17、Treg细胞的频率与治疗前MG患者外周血中相应细胞的频率相比,均无显著性差异(P>0.05)。(5)分别将LPE治疗前MG患者外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞的频率与临床评分进行相关性分析。结果发现,LPE治疗前MG患者Thl细胞及Th17细胞的频率与临床评分之间呈正相关(分别r=0.602, r=-0.583, P<0.05); Treg细胞的频率与临床评分之间呈负相关,相关系数分别为-0.536,有统计学意义(P<0.05);Th2细胞的频率与临床评分之间无相关性,相关系数为-0.248,无统计学意义(P>0.05)。(6)分别将LPE治疗3天后MG患者外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞的频率与临床评分进行相关性分析。结果发现,LPE治疗后MG患者外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞的频率与临床评分之间均无相关性,相关系数分别为0.412、-0.306.0.541、-0.483,无统计学意义(P>0.05)。(7)分别将LPE治疗3天后MG患者Th1、Th2、Th17、Treg细胞频率的变化与临床评分的改善进行相关性分析。结果发现,LPE治疗后,MG患者Thl、Th17细胞频率的下降与临床评分的改善之间呈正相关(分别r=0.613,r=0.521,P<0.05);Treg细胞频率的增高与临床评分的改善之间呈正相关(r=0.584,P<0.05);而Th2细胞频率的增高与临床评分的改善之间无相关性,相关系数为0.472,无统计学意义(P>0.05)。(8)分别将LPE治疗前MG患者外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞的频率与AChR-Ab水平进行相关性分析。结果发现,LPE治疗前MG患者Thl、Th2及Th17细胞的频率与AChR-Ab水平之间均无相关性,相关系数分别为0.457、-0.335、0.274,无统计学意义(P>0.05);Treg细胞的频率与AChR-Ab水平之间呈负相关,相关系数为-0.381,有统计学意义(P<0.05)。(9)分别将LPE治疗3天后MG患者外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞的频率变化与AChR-Ab水平变化进行相关性分析。结果发现,LPE治疗后MG患者Th1、Th2、Th17及Treg细胞频率的变化与AChR-Ab水平变化之间均无相关性,相关系数分别为0.524、0.372、0.483、0.429,无统计学意义(P>0.05)。结论:LPE通过纠正MG患者外周血Thl、Th2、Th17及Treg细胞平衡失调,发挥其对MG的治疗作用。
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