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目的:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种常见的肝病,在世界范围内都有很高的发病率,其患者多合并肥胖,虽然通过减重可以一定程度控制病情,甚至逆转肝脏病变,但减重治疗的实施与坚持往往不令人满意,治疗效果难以达到预期,因此越来越多的病人由单纯的非酒精性脂肪肝(NAFL)进展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。而在进入该阶段后,疾病进一步进展为肝纤维化、肝硬化甚至肝细胞癌的风险明显增加。因此寻找能够抑制非酒精性脂肪肝及非酒精性脂肪性肝炎进一步发展的治疗方法具有重要意义。到目前为止,许多关于非酒精性脂肪性肝病发生发展机制的研究使人们对该病有了更为深入的认识。但目前在临床上尚无有效的药物来抑制非酒精性脂肪性肝病的进展。泮托拉唑(PPZ)属于质子泵抑制剂的一种,其最主要的临床应用是治疗由于胃酸异常分泌引起的相关疾病。除了这些应用外,近年来有越来越多的新研究揭示了质子泵抑制剂在稳定和保护细胞膜、抑制炎症细胞因子产生、抗氧化、抑制纤维化等方面的作用。因此本课题的目的在于研究泮托拉唑对小鼠HFHC饮食模型肝脏组织中炎性细胞因子表达水平的影响,以期能够找到一种有效的药物来抑制非酒精性脂肪性肝病的进展,阻止甚至逆转肝脏病变,改善慢性非酒精性脂肪性肝病病人的预后,为非酒精性肝病的预防及治疗提供更多的理论依据。方法:1.将年龄4-6周的C57BL/6J雄性小鼠进行预处理:在自由饮水和正常饲料喂养一周后,留取8只继续正常饮食的小鼠作为对照组,开始给其余小鼠喂食高脂高胆固醇(HFHC)饮食:高脂肪(42%)加高胆固醇(0.2%)。在HFHC饮食喂养4周后,将小鼠随机分为3组:模型组(HFHC),泮托拉唑2mg/kg组(HFHC+PPZ 2mg/kg),泮托拉唑5mg/kg组(HFHC+PPZ 5mg/kg);随后开始对各组进行对应处理,处理期间继续HFHC饮食喂养,其中HFHC组7只,HFHC+PPZ 2mg/kg组6只,HFHC+PPZ5mg/kg组7只。用PPZ或无菌水处理小鼠16周。各组n>5。2.在上述处理完成后,先称取各小鼠的总体重,然后将小鼠处死,取出小鼠肝脏称重,分别记录总体重和肝脏重量并分别计算肝指数并进行比较。3.切取各小鼠的肝脏,利用HE染色观察模型建立是否成功及泮托拉唑对小鼠肝脏的脂肪变以及炎性病变的影响。4.在实验处理结束后,外送的基因芯片检查提示,小鼠肝脏组织中以下指标表达呈现上调:CXCL1、CXCL5、CCL2、CCR2、CD14、CD74、IL-6、IL-1α、IL-1β、TNF-α;进一步通过q RT-PCR对这些指标进行验证,并进行组间比较。结果:1.总体重统计结果显示HFHC组总体重较正常组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),HFHC+PPZ 2mg/kg组总体重较HFHC组降低,差异有统计学意义(P<0.05),HFHC+PPZ 5mg/kg组总体重较HFHC组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2.肝脏重量统计结果显示HFHC组肝重较正常组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),HFHC+PPZ 2mg/kg组肝重较HFHC组降低,差异有统计学意义(P<0.05),HFHC+PPZ 5mg/kg组肝重较HFHC组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3.肝指数统计结果显示HFHC组肝指数较正常组升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),HFHC+PPZ 2mg/kg组肝指数较HFHC组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。4.HE染色结果显示,在正常小鼠肝脏组织中,肝细胞、肝窦及肝索形态正常,结构完整。无脂滴或气球样变;HFHC组和正常组小鼠相比,肝细胞体积增大,细胞核排列无序,可见明显气球样变、大量脂滴以及炎症细胞浸润,在HFHC+PPZ 2mg/kg组中,气球样变、脂滴以及炎症细胞浸润减少,而在HFHC+PPZ 5mg/kg组中,这些改善更为明显。5.q RT-PCR实验结果统计提示,在各检测的指标中,HFHC组CCL2 m RNA表达水平较正常组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),HFHC+PPZ 2mg/kg组CCL2 m RNA表达水平较HFHC组降低,差异有统计学意义(P<0.05),HFHC+PPZ5mg/kg组CCL2 m RNA表达水平较HFHC组降低,差异有统计学意义(P<0.05);HFHC组IL-1αm RNA表达水平较正常组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),HFHC+PPZ 5mg/kg组IL-1αm RNA表达水平较HFHC组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.在小鼠高脂高胆固醇(HFHC)饮食模型中,泮托拉唑能抑制小鼠肥胖的进展。2.在小鼠高脂高胆固醇(HFHC)饮食模型中,泮托拉唑能抑制小鼠肝脏的脂肪变及炎症的进展。3.在小鼠高脂高胆固醇(HFHC)饮食模型中,泮托拉唑能降低小鼠肝脏组织中CCL2与IL-1α的表达水平。4.泮托拉唑是一种潜在的可用于临床治疗非酒精性脂肪性肝病的药物。