目的:通过观察眼针对脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI）模型大鼠脑组织自噬相关蛋白表达的影响,探讨眼针与CIRI神经细胞自噬的关系。材料与方法:将120只大鼠随机分为三组,分别为正常组（n=16）、假手术组（n=16）、造模组（n=88,其中包括提前注射抑制剂3-MA大鼠44只,普通大鼠44只）,采用改良的线栓法对造模组大鼠进行模型复制,正常组大鼠未做处理,假手术组大鼠术式同造模组,仅未插入钓鱼线。经模型评价后,将符合实验要求的所有大鼠共分为六组:正常组、假手术组、模型组、3-MA组、眼针组、3-MA+眼针组。正常组、假手术组大鼠常规饲养至实验结束,模型组大鼠前饲养至完成再灌注后;3-MA组大鼠在术前半小时采用立体定位技术在右侧脑室（囟后1mm、旁开1.5mm、深3.5mm处）注射自噬抑制剂3-MA0.6μL（600nmol）,随后同样饲养至再灌注后。眼针组大鼠针刺穴区选择肝胆区,肾膀胱区,上、下焦四区,采用斜刺的方式,从大鼠眼眶眶缘1-2mm部位进针,进针方向沿着穴区起始定位线向终止定位线方向,刺至皮下组织,进针约3mm（左眼为顺时针方向,右侧为逆时针方向）。3-MA+眼针组大鼠注射抑制剂方式同3-MA组,完成再灌注后眼针干预同眼针组,干预时间为两组大鼠脑缺血再灌注即刻、12h及取材（24h）前30分钟治疗3次,每次治疗时长为20分钟,待达到十分钟时,用刮柄对其进行刮针1次,每次5下,起到增强刺激的作用。末次干预后对各组大鼠进行神经功能缺损评分并记录。采用腹腔过量麻醉的方式处死大鼠(麻醉使用2%戊巴比妥钠溶液,剂量为200 mg·kg-1),采用透射电镜观察眼针干预前后CIRI自噬小体的形成情况;采用Western blot法及免疫组化方法观察LC3、ATG1、ATG4在神经细胞的表达水平。结果:1.各组大鼠神经缺损评分变化正常组和假手术组未出现神经功能缺损症状,评分为0。模型组大鼠出现不同程度的神经功能障碍表现,如行走时向对侧转圈或倾倒;不能完全伸展对侧前爪等,表明CIRI大鼠模型复制成功。与模型组比较,3-MA组、眼针组和3-MA+眼针组大鼠神经功能缺损评分明显下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。2.透射电镜观察自噬小体数目变化与假手术组比较,模型组可见较多自噬小体;与模型组比较,眼针组自噬小体减少,提示眼针可能是通过降低脑组织自噬水平而减轻脑缺血再灌注损伤的。3.Western blot法检测各组大鼠脑组织LC3、ATG1、ATG4蛋白的表达以β-actin为内参,与正常组比较,假手术组大鼠脑组织LC3、ATG1、ATG4蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）;与假手术组比较,模型组大鼠脑组织LC3、ATG1、ATG4蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,3-MA组、眼针组、3-MA+眼针组大鼠脑组织LC3、ATG1、ATG4蛋白表达显著下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。4.免疫组化法检测各组大鼠脑组织LC3、ATG1、ATG4蛋白的表达与正常组比较,假手术组大鼠脑组织LC3、ATG1、ATG4蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）;与假手术组比较,模型组大鼠脑组织LC3、ATG1、ATG4蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,3-MA组、眼针组、3-MA+眼针组LC3、ATG1、ATG4蛋白表达显著下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.眼针疗法能够改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损评分;2.眼针疗法能够减少脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织自噬小体的数量;3.眼针疗法可能通过降低脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织LC3、ATG1、ATG4蛋白表达来调控神经细胞过度自噬,从而改善大鼠脑缺血再灌注损伤。