目的：　　肺纤维化（PF）是间质性肺疾病的共同病理过程，是以肺泡壁病变为主，涉及周围组织及其相邻结构的一组非肿瘤、非感染性疾病群。发病率高，死亡率高,病程一般呈进行性发展,目前尚无确切有效的临床治疗药物。研究发现，氧化应激诱导的细胞氧化/抗氧化失衡是促使肺纤维化形成及进展的关键。新近研究发现，SIRT1信号通路参与了肺纤维化的发生和发展，阻断这一通路可减少肌成纤维细胞的生成，从而延缓肺纤维化的进展。该实验通过人胚肺成纤维细胞（MRC-5）氧化损伤造模先后给予羟基红花黄色素A干预，观察羟基红花黄色素A对MRC-5细胞氧化应激损伤的保护作用；干预SIRT1信号通路，观察羟基红花黄色素A对MRC-5细胞氧化/抗氧化失衡机制的调节。　　方法：　　1.MRC-5细胞氧化应激模型的构建及羟基红花黄色素A最佳作用浓度选择。H2O2诱导MRC-5细胞氧化损伤模型建立，不同浓度的H2O2作用于MRC-5细胞不同时间，检测细胞抑制率，选取H2O2最佳造模浓度和造模时间。羟基红花黄色素A对MRC-5细胞最佳作用浓度，选取IC10为最大无毒浓度，处理MRC-5细胞。　　2.观察羟基红花黄色素A对H2O2诱导MRC-5细胞氧化损伤的保护作用。分为空白组A、H2O2组B、羟基红花黄色素A(1h)+H2O2组C、H2O2+羟基红花黄色素A组D、H2O2(1h)+羟基红花黄色素A组E，以6、12、24h为时间监测点。检测各组各时间点SOD、CAT、MDA、GSH-Px表达并比较。　　3.基于SIRT1信号通路探讨羟基红花黄色素A对H2O2致MRC-5细胞氧化应激损伤保护机制。Western blotting检测各组SIRT1，FOXO3，eNOS的蛋白表达并比较。RT-PCR检测各组SIRT1，FOXO3，eNOS的表达并比较。　　结果：　　1.H2O2最佳造模浓度以及羟基红花黄色素A最佳作用浓度的选择　　1.1当H2O2浓度600μmol/L孵育24h时，使细胞抑制率达到33.96%，该刺激浓度、作用时间以及对于细胞的损伤抑制程度符合最佳造模需求，故以600umol/L H2O2预刺激24小时诱导的MRC-5氧化损伤模型进行后续试验。　　1.2.当羟基红花黄色素A的药物浓度0.3125mM率达到9.36％，该药物剂量下，细胞抑制率较低，对MRC-5细胞损伤小，药物浓度相对安全，可以考虑将0.5mM定为该实验的药物最大无毒浓度。　　2.观察羟基红花黄色素A对H2O2诱导MRC-5细胞氧化损伤的保护作用　　羟基红花黄色素A能明显提高MRC-5细胞内各抗氧化指标SOD、CAT、GSH-Px活力，同时能显著降低提示机体氧化损伤的指标MDA、ROS表达水平，统计学意义显著（P＜0.05）。　　3.基于SIRT1信号通路探讨羟基红花黄色素A对H2O2致MRC-5细胞氧化应激损伤保护机制。　　羟基红花黄色素A能明显提高MRC-5细胞SIRT1，FOXO3，eNOS的表达水平，具有明显的统计学意义（P＜0.05）。　　结论：　　1.过氧化氢可诱导发生MRC-5细胞发生氧化应激损伤。　　2.一定浓度的羟基红花黄色素A可上调MRC-5细胞应激水平发挥对氧化损伤的治疗作用。　　3.H2O2降低SIRT1，FOXO3，eNOS的表达，提示SIRT1信号通路在氧化应激损伤过程中扮演重要角色。羟基红花黄色素A可以显著提SIRT1，FOXO3，eNOS的表达，提示羟基红花黄色素A可以有效拮抗MRC-5细胞氧化应激损伤，且通过调控SIRT1信号通路实现，发挥抗氧化应激保护作用。　　4.加入羟基红花黄色素A时间不同，抗氧化作用有差异。SOD、CAT、GSH、FOXO3、eNOS表达量C＞D＞E，MDA、ROS表达量C＜D＜E，说明提前加入羟基红花黄色素A抗氧化作用优于氧化后立即给予羟基红花黄色素A，且二者同时优于氧化后一小时给予羟基红花黄色素A，说明对于羟基红花黄色素A抗氧化作用，预防效果最好，氧化后立即用药效果优于氧化后隔时给药。