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目的:本实验通过观察温针灸对膝骨关节炎（Knee Osteoarthritis,KOA）模型兔软骨下骨中骨保护素（Ostoeprotegerin,OPG）与核因子κB受体活化因子配体（Receptor activator of NF-κB Ligand,RANKL）的表达水平及比值变化的影响,探讨温针灸治疗KOA的作用机制。方法:选取6月龄新西兰雄兔40只,随机分为空白组与造模组,其中空白组10只,不予处理,造模组30只,采用管型石膏伸直位固定法制动4周,经X线检查确定是否造模成功,将造模成功的KOA模型兔按随机数字表法分为模型组、阿仑膦酸钠组（简称西药组）、温针灸组,每组10只,经2周实验干预后取材。取材前对兔右侧患肢进行Lequesne MG步态评分,取材后观察右侧股骨远端及胫骨平台骨表面并进行Pelletier JP评分;采用HE染色观察各组软骨下骨及软骨形态结构的改变;TRAP染色观察破骨细胞分化情况;免疫组化及Western blot检测各组软骨下骨组织中OPG、RANKL蛋白的表达;q PCR检测各组软骨下骨组织中OPG、RANKL m RNA的表达。采用SPSS20.0统计学软件对所得数据进行统计。结果:1.行为学观察及Lequesne MG步态评分结果:拆除石膏后对各组实验兔行为学进行评分,与空白组相比,模型组、西药组、温针灸组Lequesne MG步态评分均明显上升（P<0.01）,三组间评分无差异P（>0.05）。干预后各组行为学比较:与空白组相比,模型组Lequesne MG步态评分较高（P<0.01）;与模型组相比,西药组与温针灸组评分均显著下降（P<0.01）,且两组评分无明显差异（P>0.05）。2.大体观察及Pelletier JP评分结果:与空白组相比,模型组软骨表面均有明显磨损,充血明显,边缘处有明显赘生,Pelletier JP评分升高（P<0.05）;西药组软骨透明度较差,软骨面有少许磨损,少数软骨边缘有增生,Pelletier JP评分较模型组下降（P<0.05）;温针灸组软骨表面有轻微磨损,软骨透明度下降,未见明显增生,Pelletier JP评分较模型组下降（P<0.05）。3.HE染色及Mankin’s评分结果:模型组软骨下骨破坏严重,骨小梁架构紊乱,软骨层明显变薄,表面粗糙,与空白组相比,Mankin’s评分升高（P<0.01）;西药组软骨及软骨下骨着色较均匀,骨小梁未有严重破坏,Mankin’s评分较模型组降低（P<0.01）。温针灸组骨小梁完整,软骨辐射层与钙化层未见破坏,深层软骨细胞排列较模型组整齐,Mankin’s评分较模型组降低（P<0.01）。4.抗酒石酸性磷酸酶（TRAP）染色结果:模型组TRAP染色较深,破骨细胞数量较空白组增多（P<0.05）;与模型组相比,西药组TRAP染色变浅,阳性细胞数减少（P<0.05）,温针灸组破骨细胞阳性染色减少,分化较低（P<0.01）。5.免疫组化实验结果:模型组OPG蛋白较空白组无明显变化（P>0.05）,RANKL蛋白显著增多（P<0.01）,OPG/RANKL比值明显降低（P<0.01）;与模型组相比,西药组OPG蛋白阳性着色明显增加（P<0.01）,RANKL蛋白降低（P<0.01）,OPG/RANKL比值升高（P<0.01）;温针灸组OPG蛋白增多明显（P<0.01）,RANKL蛋白降低（P<0.01）,OPG/RANKL比值升高（P<0.01）。6.Western blot实验结果:与空白组相比,模型组OPG蛋白表达无明显差异（P>0.05）,RANKL蛋白表达显著升高（P<0.01）,OPG/RANKL比值降低（P<0.01）;与模型组相比,西药组OPG蛋白表达上调显著（P<0.01）,RANKL蛋白降低（P<0.01）,OPG/RANKL比值升高（P<0.01）;温针灸组OPG蛋白表达有明显上升（P<0.01）,RANKL蛋白降低（P<0.01）,OPG/RANKL比值升高（P<0.01）。7.q PCR实验结果:与空白组相比,模型组OPG m RNA无显著变化（P>0.05）,RANKL m RNA表达水平显著升高（P<0.01）,OPG/RANKL比值未发生明显改变（P>0.05）;与模型组相比,西药组与温针组OPG m RNA无显著差异（P>0.05）;RANKL m RNA较模型组均下调（P<0.01）,OPG/RANKL比值均有显著升高（P<0.01）。结论:1.温针灸可修复骨小梁损伤,延缓软骨下骨受损,防止膝关节退变。2.温针灸可通过促进骨保护因子OPG,抑制破骨细胞活化因子RANKL,上调OPG/RANKL比值水平表达,从而调节软骨下骨重塑平衡,延缓KOA发展。